Анализ пцр для мужчин

Высокоинформативный метод ПЦР (полимеразная цепная реакция) дает возможность раннего выявления различных генетических и инфекционных болезней, протекающих остро или хронически. Причем выявить их можно еще на том этапе, когда они не проявляют себя никакими симптомами. Чаще всего к анализу ПЦР прибегают для обнаружения инфекций передающихся половым путем (ЗППП, ИППП).

Что такое ПЦР анализ

Анализ ПЦР относится к молекулярному методу диагностики, который основан на многократном увеличения малых концентраций определенных фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) возбудителя в любом биологическом материале (мазке из шейки матки, влагалища, уретры, крови, слюны, мокроте и т. д.) и сопоставление его ДНК или РНК с базой данных известных видов возбудителей инфекций.

Методика разработана американцем Кэрри Мюллисом в 80-х годах прошлого столетия. В 1993 ученый стал лауреатом Нобелевской премией в области химии. Сегодня исследование ПЦР считается своего рода «золотым стандартом» для диагностирования подавляющего большинства инфекций. Анализ ПЦР повсеместно применяется в медицинской практике для уточнения характера болезни и постановки точного диагноза. Очень часто бывают случаи, когда все известные иммунологические, вирусологические и бактериологические методы не действуют. Тогда ПЦР становится единственным способом, с помощью которого можно выявить активную стадию заболевания.

Преимущества ПЦР-диагностики над другими методами

Методика ПЦР нашла широкое применение в современной медицине благодаря ряду бесспорных преимуществ. Расскажем о них более подробно.

Возможность прямого выявления присутствия возбудителя

Многие из традиционных диагностических методик основаны на определении маркеров – белков, которые являются продуктами жизнедеятельности возбудителя болезни. Такой принцип диагностики может дать только опосредованное подтверждение патологии. Метод ПЦР обеспечивает прямое определение возбудителя, поскольку выявляет специфические участки ДНК патогенных организмов.

Высокая специфичность

Методика ПЦР отличается высокой специфичностью благодаря тому, что позволяет выявлять фрагменты ДНК, характерные только для конкретного инфекционного агента. При использовании иммунологических методов остается вероятность получить ложный результат (ошибки в диагностике связаны с перекрестно-реагирующими антигенами). Что касается ПЦР, то здесь ошибки исключены, поскольку специфичность в данном случае задается нуклеотидной последовательностью праймеров.

Высокая чувствительность

Посредством этого метода определяются даже единичные болезнетворные микроорганизмы. Возбудители инфекций выявляются в организме человека даже тогда, когда другие методы диагностики не проясняют ситуацию (речь идет о различных иммунологических микроскопических и бактериологических способах исследования).

Приведем данные для сравнения. Чувствительность микроскопических и иммунологических методов составляет 103-105 клеток, а чувствительность ПЦР – 10-100 клеток в пробе.

Универсальность метода

Методика ПЦР основана на исследовании ДНК патогенных организмов. В процессе исследования определяются фрагменты РНК или ДНК, которые являются специфичными для конкретных возбудителей инфекций. Поскольку все нуклеиновые кислоты имеют сходный химический состав, при лабораторном анализе можно применять унифицированные методики. А это значит, что исследование одной пробы дает возможность выявлять сразу несколько возбудителей.

Быстрое получение результатов

Данная методика не требует выращивания культур возбудителей, на которое уходит довольно много времени. Благодаря применению унифицированной технологии обработки материала и выявления продуктов реакции, а также автоматизированному процессу амплификации вся процедура исследования занимает лишь несколько часов.

Возможность выявления инфекций в латентной форме

Методика ПЦР дает возможность эффективно выполнить доклиническую диагностику (выявление возбудителей до появления симптоматики) и ретроспективную диагностику (определение патогенов после перенесенной болезни). Так, доклиническая диагностика имеет большое значение при обследовании пациента в инкубационном периоде возможного заболевания – после предполагаемого заражения до возникновения первых признаков.

Одним из важных преимуществ ПЦР является возможность использования для анализа биологических остатков или архивных материалов. Это дает возможность идентифицировать отцовство и личность.

На сегодняшний день методы ПЦР-диагностики продолжают развиваться. Усовершенствуется сама технология проведения анализа, а также появляются новые виды ПЦР. В медицинскую практику внедряются инновационные тест-системы для этой реакции. Благодаря такому быстрому развитию науки стоимость процедуры уменьшается, и теперь обследование ПЦР может применяться для многих категорий пациентов.

Суть метода ПЦР

В основе этого метода диагностики лежит многократное удвоение данного участка РНК или ДНК. Этот процесс реализуется в лаборатории с использованием особых ферментов. В итоге формируется столько участков ДНК (РНК), сколько нужно для визуального исследования. Во время процедуры копируется лишь участок, соответствующий заданным условиям (если он присутствует в изучаемом образце).

Биологический материал, которые необходимо исследовать на наличие ДНК или РНК возбудителей помещают в амплификатор. (В зависимости от конкретной ситуации для анализа берут кровь, мочу, слюну, отделяемое из половых органов). Затем к образцам добавляют особые ферменты. Они связываются с РНК или ДНК патогенных микробов, и начинается синтез копий. Копирование представляет собой многоэтапный процесс, протекающий по типу цепной реакции. В результате возможно появление сотен или даже тысяч копий.

На следующем этапе диагностики результаты анализируются и сопоставляются с базой данных возбудителей инфекций.

Методика ПЦР не просто дает возможность определить вид патогенного организма, но и позволяет сделать выводы о количестве возбудителей инфекции в человеческом организме.
Сегодня применение подобных технологий открывает широкие возможности при исследовании мутаций, сращивания участков ДНК. В современной медицине метод начал применяться для определения отцовства, выявления новых генов и многого другого.

Благодаря своей универсальности метод ПЦР нашел широкое применение в урологии, гинекологии, пульмонологии, онкологии, гематологии, фтизиатрии, практике инфекциониста и других областях медицины.

Материал для анализа ПЦР

Для ПЦР диагностики применяются различные биологические среды и жидкости, взятые из организма человека: мокрота, слизь, слюна, моча, кровь, соскоб эпителиальных клеток, ткани плаценты, плевральная жидкость, околоплодная жидкость, сок простаты и др.

При диагностике ЗППП (ИППП) анализу подвергаются выделения из мужских и женских половых органов. Для этого выполняют мазок или соскоб из уретры или шейки матки. Также для исследования используют мочу.

Для выявления инфекций (герпес, мононуклеоз, ЦМВИ, токсоплазмоз, ВИЧ, гепатиты В и С) на анализ берут кровь. При подозрениях на поражения нервной системы производят забор спинномозговой жидкости.

Для пульмонологических исследований используют плевральную жидкость и мокроту.

Для выявления внутриутробных инфекций анализу подвергают ткани плаценты и околоплодную жидкость.

ПЦР на ИППП и другие инфекции

Какие инфекции можно выявить с помощью анализа ПЦР

– ВИЧ-инфекция (можно выявить вирус иммунодефицита человека ВИЧ-1).

– Вирусные гепатиты А, В, С, G ( РНК-HAV, ДНК-HBV, РНК-HCV, РНК-HGV).

– ИППП (инфекции, передающиеся половым путем) – уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз.

– Инфекционный мононуклеоз (ДНК вируса Эпштейн-Барр -ВЭБ).

– Цитомегаловирусная инфекция (ДНК-CMV).

– Герпетическая инфекция (ДНК- вируса простого герпеса ВПГ 1 и 2 типа).

– Туберкулез (микобактерия туберкулеза).

– Онкогенные вирусы – папилломавирусная инфекция (вирус папилломы человека (в том числе его онкогенные виды 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58, и 59).

– Боррелиоз, клещевой энцефалит.

– Кандидоз (грибы рода Candida).

– Хеликобактерная инфекция (Helicobacter pylori)
и другие.

Подготовка и сдача анализа ПЦР

Пациенты, сдавшие материал для проведения ПЦР диагностики, рассчитывают на получение быстрого и точного результата. При этом нужно учесть один важный момент – достоверность диагностики зависит не только от профессионализма специалистов и возможностей медицинской лаборатории. Чтобы исследование было информативным, должен приложить усилия и сам больной. Так, необходимо строго придерживаться всех рекомендаций доктора и тщательно соблюдать правила подготовки к сбору материала. Очень важно не допустить загрязнения биологических образцов, иначе результаты обследования будут искажены.

Подготовка к анализу ПЦР

Подготовка к процедуре не связана особыми сложностями. Достаточно запомнить несколько правил:

– Кровь на анализ ПЦР сдается натощак. Кровь берут из вены обычно с утра стерильной иголкой в специальный контейнер.

– В течение суток до забора материала показано половое воздержание при взятие мазка ПЦР на ИППП.

– Для анализа мочи на ПЦР берется первая порция, емкость должна быть стерильной.

Как берут анализ ПЦР у мужчин и женщин

Анализ ПЦР берут у мужчин и женщин в прививочном кабинете, это кровь из вены, слюну, мазки из глотки, миндалин, смывы из носоглотки и т.д. Метод забора не отличается.

ПЦР на ИППП сдают в женской консультации при гинекологическом осмотре у женщин, это мазки из влагалища, шейки матки, уретры. У мужчин во время посещения андролога или венеролога, это мазок из уретры.

Схемы забора материала на ПЦР

Схема забора материала на ПЦР из носа

Схема забора материала на ПЦР с миндалин

Схема забора материала на ПЦР со слизистой глаз

Схема забора материала на ПЦР со слизистой щеки

Схема забора материала на ПЦР у женщин

Схема забора материала на ПЦР у мужчин

Сколько по времени делается ПЦР

Пациентам не приходится долго ждать результатов ПЦР-обследования. На всю процедуру анализа обычно уходит от нескольких часов (ПЦР в реальном времени) до 2-10 суток. Как правило, результаты анализа на руки пациент получает через 2-5 дней, максимально до 10 дней, это зависит от вида анализа. Дольше всего делается ПЦР-диагностика крови на ВИЧ и гепатиты, а меньше всего мазки и соскобы – 2-3 дня.

Расшифровка ПЦР анализа

Отрицательный результат говорит о том, что на данный момент в биологическом материале не выявляются следы возбудителей инфекции. То есть инфекция, по поводу которой проводилось обследование, отсутствует.

Положительный результат говорит об обнаружении следов возбудителя в биологических образцах. Это значит, что в данное время в организме человека присутствует инфекция.
Возможны случаи, когда ПЦР дает положительный результат, но активного инфекционного процесса не наблюдается. Речь идет о явлении, которое называют «здоровым носительством». Лечение таким пациентом не требуется, но они должны находиться под постоянным динамическим наблюдением. Такие ситуации характерны для вирусных инфекций: вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ), гинитальный герпес, цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ), вирус папилломы человека(ВПЧ), при которых для исследования берутся образцы из местных очагов (соскоб уретры, цервикального канала, слюна). При этом нельзя забывать, что здоровый носитель может передать инфекцию другим людям. Кроме того, не исключена активация инфекционного процесса. В случаях, когда ПЦР дает положительный результат при исследовании крови, это уже нельзя считать носительством. Таким пациентам необходимо специфическое лечение заболевания вызванного обнаруженным возбудителем.

Количественные показатели не имеют общих градаций. Их оценивает врач индивидуально для каждой конкретной инфекции. Количественный результат дает возможность определить насколько активна инфекция и выявить стадию процесса.

Достоверность ПЦР-метода

Для оценки эффективности методики есть три критерия:

– Точность – выявление инфекции (или ее отсутствия) с высокой степенью вероятности.

– Специфичность – точность определения конкретного возбудителя.

– Чувствительность – возможность идентификации возбудителя даже при малом количестве генетического материала в биологических образцах.

При использовании метода ПЦР получение ложноположительных результатов практически невозможно (то есть, если возбудитель отсутствует, то положительной проба не будет).

Ложноотрицательный результат возможен, но такое происходит довольно редко. Подобные ситуации возникают, если инфекция на момент исследования неактивна. К примеру, хроническая инфекция вне активности или же латентная инфекция.

Анализ ПЦР: видео

ПЦР (полимеразная цепная реакция) диагностика — метод выявления ДНК вирусных агентов и инфекционных возбудителей в биоматериале пациента. Методика активно применяется в венерологической, урологической практике и практике врачей-инфекционистов.

Если не вдаваться в технические сложности, суть метода заключается в многократном воспроизведении ДНК при определенных температурных режимах. В результате диагносты могут получить полноценную цепочку ДНК в количестве достаточном для изучения и определения патогенного агента. Методика позволяет обнаружить следы генетического материала того или иного возбудителя в крови, моче, иных биологических образцах.

Анализ ПЦР — наиболее точный метод диагностики ИППП

При подозрениях на какие заболевания назначается исследование?

Многие заболевания, передающиеся половым путем имеют слабую, смазанную клиническую картину. Это, например, цитомегалия (поражение вирусом герпеса пятого типа), уреаплазмоз. Выраженных симптомов данные и некоторые другие болезни не имеют, либо их можно списать на проявления иных недугов. В данном случае метод ПЦР незаменим и применяется наравне с ИФА (поиском антител в крови к тем или иным возбудителям).

Вначале выделяется ДНК/ РНК, затем идет ПЦР

Какие же патологии можно выявить посредством ПЦР? Сюда входят:

• уреаплазмоз;
• хламидиоз;
• гонорея;
• сифилис;
• поражение герпетическими агентами всех типов;
• ВИЧ-инфекция;
• гепатит подтипов B и C;
• кандидоз;
• цитомегаловирусная инфекция (стоит выделить отдельно от иных герпетических возбудителей);
• трихомониаз;
• поражение вирусом папилломы человека.

Теоретически, полимеразная цепная реакция позволяет выявить много больше возбудителей, однако в контексте венерических заболеваний перечень будет именно таким.

Подготовка к исследованию

Методы подготовки стандартны и не требуют больших усилий от пациента:

Перед направлением на анализ ПЦР врач даст рекомендации по подготовке

• Лучше всего сдавать анализы в период обострения того или иного инфекционного заболевания, реального или вероятно существующего. Так будет проще обнаружить генетический материал вируса.
• За 3 часа до сдачи анализа рекомендуется не мочиться (если речь идет о сдаче мочи или мазке из уретры).
• Перед сдачей анализа рекомендуется провести гигиену половых органов (также, если речь идет о сдаче мочи или мазке).
• Отказаться от сексуальных контактов (за 2-3 дня до обследования).
• За неделю до исследования исключается прием антибактериальных препаратов. Они могут смазать клиническую картину.

Как производится забор биоматериала

Для начала нужно определиться, какой биоматериал подлежит исследованию. Может быть произведен забор:

• мочи;
• крови;
• уретральных выделений;
• секрета предстательной железы (редко).

Зонд вводят в уретру и поворачивают

Моча сдается в стерильной пластиковой таре. В тот же день производится анализ биоматериала. Кровь забирают из вены. Что касается уретральных выделений, их собирают одноразовым зондом с тампоном на конце.

Зонд вводится в уретру на глубину 2-3 см, круговым движением собирают секрет или экссудат, помещают тампон в стерильную посуду. Сам по себе процесс у мужчин может быть несколько болезненным, но вполне терпимым.

Анализ проводится 1-2 дня. В исключительных случаях врач может порекомендовать пациенту пройти исследование повторно, спустя полторы-две недели. Но речь лишь о сомнительных клинических ситуациях.

Бояться мужчинам совершенно нечего. В процессе сдачи возможны минимальные дискомфортные ощущения, но здоровье того стоит.

ПЦР анализ у мужчин – один из самых информативных методов диагностики инфекционных заболеваний. Он предполагает обнаружение заданного фрагмента ДНК в клиническом материале.

Как делают анализ ПЦР у мужчин?

Анализы методом ПЦР у мужчин базируются на определении бактериальной, вирусной, грибковой ДНК. Заданный фрагмент нуклеотидной последовательности обнаруживается и многократно копируется.

Исследование включает такие этапы:

• Выделение ДНК (подготовка полученного от пациента клинического материала для исследования).

• Амплификация ДНК (множественное копирование нуклеотидной последовательности).
• Детекция – отделение продуктов амплификации путем добавления в смесь флуоресцирующих (светящихся) веществ.

Преимущества метода:

• высокая чувствительность – положительный результат возможен даже при наличии 10-100 клеток в биоматериале;
• высокая специфичность – обнаруживается только определенная последовательность ДНК, характерная для одного возбудителя инфекции;
• прямое определение инфекционного агента, а не выявление косвенных признаков его пребывания в организме;
• может использоваться любой биоматериал, полученный инвазивным или неинвазивным способом;
• на диагностику требуется лишь несколько часов.

ПЦР анализ – как его берут у мужчин?

Как берется анализ ПЦР у мужчин, зависит от того, какой клинический материал он сдает.

В свою очередь тип биоматериала определяется:

• клиническими признаками болезни;

• подозрением на определенную инфекцию.

Чаще всего проводится ПЦР мазка у мужчин на урогенитальные инфекции. Его берут из уретры специальным зондом. Эта процедура в нашем медицинском центре проходит безболезненно. Собранный биоматериал помещается в транспортную среду и отправляется в клиническую лабораторию.

Альтернативой соскобу из уретры может служить другой клинический материал из органов мочеполовой системы. Часто проводится ПЦР в сперме у мужчин. В эякуляте может быть обнаружена инфекция в случае поражения яичек или придатков.

Нередко назначается ПЦР мочи у мужчин. Это исследование используется при подозрении на локализацию инфекции в мочевыделительной системе (почки, мочевой пузырь, мочеточники). Кроме того, оно позволяет заменить соскоб из уретры, если человек отказывается сдавать клинический материал. Часто пациенты спрашивают, чем отличается ПЦР мочи и мазка у мужчин. Отличия незначительные, но они все же существуют. Мазок более информативен, так как позволяет обнаружить возбудителей вирусных инфекций, например, ВПЧ. Моча же используется главным образом для диагностики ИППП бактериальной, грибковой или протозойной этиологии.

ПЦР секрета простаты у мужчин используется при подозрении на простатит. Биоматериал получают после ручной стимуляции предстательной железы. Несколько капель выделившегося через уретру секрета врач собирает в специальный контейнер. Если секрет не выделяется, это означает, что его количество низкое.

Тогда врач просит пациента помочиться и собрать первую порцию мочи. Она вымывает секрет простаты и в нем может быть обнаружена ДНК возбудителя инфекции. Иногда используется ПЦР мазок из ануса у мужчин.

Он необходим в таких случаях:

• при наличии кондилом в аноректальной области;
• при однополых сексуальных контактах в анамнезе (для диагностики проктита, вызванного возбудителями половых инфекций);
• при обнаружении клинических признаков проктита.

ПЦР мазок изо рта у мужчин врач может взять для диагностики:

• герпеса 1 или 2 типов;
• папилломавирусной инфекции;
• кандидоза;
• половых инфекций (при наличии симптомов фарингита или тонзиллита).