Вирус эпштейна барр анализы

Вирус Эпштейна-Барр очень распространен в человеческой среде, им инфицировано больше половины населения. Проявления инфекции разнообразны. Она может протекать бессимптомно или вызывать серьезные патологии, которые приводят к летальному исходу. Поэтому анализ на вирус Эпштейна Барр имеет широкое применение в клинической практике и позволяет определить стадию течения заболевания и его активность.

Показания для диагностики

Чтобы назначить исследование крови, нужно определиться с показаниями для анализа и выбрать наиболее подходящий вид диагностики. Анализ крови назначают в таких случаях:

• подтверждение инфекционного мононуклеоза;
• увеличение затылочных, шейных, подчелюстных лимфоузлов;
• симптомы, напоминающие мононуклеоз у лиц с иммуносупрессией, после химиотерапии, пересадки органов;
• частые рецидивы воспалительных заболеваний ротоглотки;
• профилактическое исследование;
• гепатит неустановленной этиологии, а также увеличение печени и селезенки;
• болезни желудочно-кишечного тракта, плохо поддающиеся стандартному лечению;
• перенесенный мононуклеоз у женщин, планирующих беременность;
• отягощенный акушерский анамнез, дети с врожденными пороками, мертворождения или самопроизвольные выкидыши;
• дети с признаками внутриутробной инфекции или рожденные женщинами с высоким риском передачи болезни;
• новорожденные с сепсисом, гепатитом, менингоэнцефалитом, пневмонией.

Для взрослых людей используют серологические тесты, направленные на определение различных классов антител. Также показательна полимеразная цепная реакция. Для новорожденных необходимо применять ПЦР, чтобы определить наличие ДНК вируса. В серологических тестах выявить IgM невозможно, иногда появляются IgA к некоторым ранним типам антител.

Подготовка к анализу

Правильная подготовка к анализу позволяет избежать сгущения крови и неверной интерпретации результатов. Основным исследуемым материалом является кровь, но для ПЦР может использоваться спинномозговая жидкость, слизь из носоглотки, соскоб клеток носоглотки, половых органов.

За сутки до анализа исключают алкоголь, жирную еду. Последний прием пищи должен быть не позднее 20:00. Кровь сдают натощак, при этом перед ее забором нельзя курить и следует отдохнуть около 15 минут. Если пациент принимает какие-либо лекарства, нужно прекратить это делать на время анализа, в остальных случаях достаточно предупредить лаборанта.

Ребенка до 5 лет нужно поить кипяченой водой на протяжении 30 минут до сдачи крови. Объем выпитого может достигать 200 мл.

Серологическая диагностика

Для исследования необходимо сдавать венозную кровь. С помощью иммуноферментного анализа определяют различные классы иммуноглобулинов. Это специфические белки, которые вырабатываются клетками крови для нейтрализации и запоминания возбудителя. Они выводятся отдельно для различных пептидных структур вируса: капсида, ядра.

Расшифровать результаты анализа можно по порядку появления антител. Первыми в крови определяются IgM, они синтезируются к капсидному антигену (VCA) и появляются в период острой болезни. Исчезают иммуноглобулины через 4—6 недель от начала заболевания. При реактивации латентной инфекции эти антитела также появятся.

К капсидному антигену также выделяются IgG. Эти антитела сохраняются пожизненно, но при обострении болезни их количество увеличивается.

IgG к раннему антигену ЕА появляются с началом острой фазы болезни при первичном инфицировании, а также при реактивации. Их можно выявить через 1—2 недели после заражения, сохраняются они до 4 месяцев после выздоровления.

О перенесенной ранее инфекции говорит выявление ядерного антигена IgG EBNA. В крови они появляются только через 4—6 месяцев после начала заболевания. Даже при латентном течении болезни этот класс иммуноглобулинов выделяется в крови. Они не исчезают на протяжении всей жизни.

Расшифровка серологического анализа на вирус Эпштейна-Барр включает количественное определение антител. Каждая лаборатория использует свои тест-системы, в которых применяются различные нормы показателей. Поэтому расшифровывать конкретный анализ может только лечащий врач. Диагностику проводят в динамике, анализы назначают через 2 недели, затем еще через 4 и 6 недель, 3 и 6 месяцев. По нарастанию и убыванию типов и титров антител можно определить течение заболевания.

Метод лабораторного поиска направлен на выявление ДНК возбудителя. Предметом исследования становятся любые биологические жидкости, в том числе и моча, секрет простаты, слюна.

И у больных, и у носителей вируса исследование выявит его нуклеиновую кислоту. Поэтому для точности диагностики применяют анализ с заданной чувствительностью. Для носителей это до 10 копий в пробе, у больных должно быть 100 копий.

Ребенок до 3 лет имеет несформированный иммунитет, поэтому метод ПЦР является основным в диагностике вирусной инфекции.

Расшифровка заключения лаборатории не представляет сложности: положительный результат говорит о наличии вируса в организме, отрицательный — возбудителя нет.

Другие лабораторные исследования

Обнаружить измененные клетки, которые поражены ВЭБ, можно с помощью общего анализа крови. В мазке определяются атипичные мононуклеары, а также повышение общего уровня лейкоцитов и СОЭ, при норме 3,9—10,0*109 ед/л и 2—16 мм/ч соответственно. В некоторых случаях врачи ограничиваются анализом крови, чтобы поставить диагноз «инфекционный мононуклеоз».

Вирус поражает печень и селезенку, поэтому проводят печеночные пробы. Отклонения касаются повышения уровня трансаминаз, тимоловой пробы, общего билирубина и щелочной фосфотазы. Значительное увеличение показателей говорит о развитии осложнения мононуклеоза — токсического гепатита.

В некоторых случаях по показаниям назначают иммунограмму. Этот анализ определяет иммунный статус пациента, который может оказаться повышенным или пониженным. Результаты диагностики помогают выбрать подходящее лечение.

Вирус Эпштейна–Барр (ВЭБ), или вирус герпеса 4 типа – ДНК–содержащий лимфопролиферативный вирус семейства Herpesviridae подсемейства Gammaherpesvirinae рода Lymphocriptoviruses. Инфекция, вызываемая ВЭБ – антропонозное инфекционное заболевание. ВЭБ тропен к В-лимфоцитам, при этом в одних случаях В-лимфоциты после заражения трансформируются в бласты и продолжают пролиферировать со сроком до 22 дней, в других случаях ВЭБ инфицирует В-лимфоциты без нарушения пролиферации с включением ДНК в виде плазмиды, передаваемой через ряд генераций этих клеток. Вирус способен инфицировать клетки эпителия рото- и носоглотки, низкодифференцированные клетки эпителия канальцев слюнных желез и тимуса, поражать моноциты периферической крови. Его геном обнаруживается и в Т-лимфоцитах со способностью клеток к экспрессии ранних и мембранных антигенов. Отличием ВЭБ от других герпес-вирусов является его способность вызывать не цитолиз, а размножение пораженных клеток В-лимфоцитов. При этом формируется латентная инфекция и в некоторых клетках макроорганизма пожизненно персистирует геном ВЭБ, инфекционный характер вирус приобретает в периоды реактивации.

Источник инфекции – больной человек или носитель. Пути передачи: воздушно- капельный, половой, парентеральный, трансплацентарный. Факторами передачи вируса являются слюна, кровь, сперма, вагинальные секреты, донорские органы и ткани, предметы обихода, игрушки, контаминированные зараженной слюной. В течение 2 ч после инфицирования человека этим вирусом уже начинается синтез белков вируса, через 8 ч накапливается его максимальное количество, а через 10 ч появляются первые вирионы, обладающие инфекционными свойствами. В слюне, в смывах из ротоглотки у здоровых лиц вирус обнаруживают в 15–25% случаев. Частота выделения вируса резко возрастает при нарушениях в иммунной системе.

Восприимчивость населения к ВЭБ – высокая. Наряду с известной ролью ВЭБ в качестве возбудителя инфекционного мононуклеоза, лимфомы Беркитта и назофарингеальной карциномы, отмечают его вклад в развитие синдрома хронической усталости. По данным ряда авторов, ВЭБ может приводить к внутриутробному инфицированию плода с неблагоприятными исходами беременности и влиять на состояние здоровья новорожденных и детей раннего возраста.

В большинстве случаев острая ВЭБ-инфекция в детском возрасте носит бессимптомный характер, в то же время у подростков и молодых лиц (обычно до 20-25 лет) лиц заражение ВЭБ в 25–70% случаев приводит к развитию инфекционного мононуклеоза. Пик частоты инфекционного мононуклеоза приходится на 14–18 лет, и у большинства взрослых выявляют антитела к ВЭБ. Осложнения мононуклеоза редки, но возможно развитие аутоиммунной гемолитической анемии, тромбоцитопении, агранулоцитоза, разрыв селезенки, гепатит, перикардит, миокардит, поражение нервной системы (менингит, энцефалит, поражение черепных нервов, миелит, полирадикулит, полинейропатия, синдром Гийена–Барре). Клинические проявления поражения нервной системы возникают в 0,5–7,5% случаев; у 25% больных инфекционным мононуклеозом выявляют патологические отклонения показателей состава ликвора.

Происхождение волосатой лейкоплакии тесно связано с высоким уровнем репликации вируса ВЭБ в клетках эпителия языка. Наличие волосатой лейкоплакии непосредственно указывает на ВИЧ-инфекцию (у 98% лиц с этим поражением выявляют антитела к ВИЧ), а также на ее прогрессию.

Половина всех ВИЧ-связанных неходжкинских лимфом ассоциированы с ВЭБ. Частота первичной лимфомы головного мозга существенно увеличилась за последние 10 лет; данной патологией страдают до 10% больных ВИЧ-инфекцией с выраженной иммуносупрессией (количество CD4+ Т-лимфоцитов менее 100 клеток/мкл). Лимфома ЦНС является второй по частоте после токсоплазмоза причиной очаговых поражений головного мозга у взрослых больных на поздних стадиях ВИЧ-инфекции.

• Подтверждение диагноза инфекционного мононуклеоза;
• мононуклеозоподобный синдром у лиц с ослаблением иммунитета (ВИЧ, химиотерапия по поводу злокачественных новообразований, иммуносупрессивная терапия при трансплантации внутренних органов и т.п.);
• лимфаденопатия (с преимущественным увеличением затылочных, заднешейных и подчелюстных лимфоузлов);
• рецидивирующие воспалительные заболевания ротоглотки;
• профилактические скрининговые исследования;
• высыпания на коже (мононуклеозоподобная сыпь);
• гепатит неясной этиологии;
• гепатоспленомегалия;
• патология ЖКТ, плохо поддающаяся стандартной терапии;
• наличие отягощенного акушерского анамнеза (перинатальные потери, рождение ребенка с врожденными пороками развития);
• наличие в анамнезе у беременных женщин или женщин, планирующих беременность, перенесенного инфекционного мононуклеоза;
• дети, имеющие симптоматику врожденной инфекции, пороки развития или рожденные женщинами из группы риска по внутриутробной передаче ВЭБ;
• пациенты (в первую очередь новорожденные) с сепсисом, гепатитами, менингоэнцефалитом, пневмонией, поражением ЖКТ.

Дифференциальная диагностика. Аденовирусная инфекция, краснуха, корь, ЦМВИ (мононуклеозоподобная форма), острая ВИЧ–инфекция (мононуклеозоподобный синдром), псевдотуберкулез (мононуклеозоподобный синдром); ангина, дифтерия ротоглотки, лимфогранулематоз.

Материал для исследования

• Кровь, плазма крови, лимфоциты или лейкоциты, мокрота, моча, слюна, СМЖ, соскобы из зева смывы из носоглотки – выявление ДНК, определение АГ;
• сыворотка крови – определение АТ.

Этиологическая лабораторная диагностика включает выявление ДНК и АГ возбудителя, определение АТ к антигенам вируса Эпштейна – Барр в крови.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Определение вирусоспецифических АТ – распространенный способ диагностики ВЭБ. Идентифицированы несколько групп АГ ВЭБ, выявление АТ к которым позволяет не только определять наличие инфекции, но также дифференцировать стадии заболевания, прогнозировать его развитие и контролировать эффективность проводимых лечебных мероприятий. В ранней фазе литического цикла вирус вырабатывает ранний АГ (EBV-EA), затем одновременно с вирусным геномом появляется капсидный АГ (EBV-VCA). Во время латентного цикла происходит синтез ядерного АГ (EBV-NA), латентных мембранных белков и небольших молекул РНК. Определение АТ IgM и IgG к отдельным белкам позволяет более точно определять фазу течения инфекции, учитывая высокую частоту персистенции вируса.

Использование метода иммуноблота для определения АТ класса IgM и IgG к отдельным белкам дает дополнительную информацию о фазе течения инфекции. Выявление белка VСА 125 указывает на раннюю фазу течения инфекции. В период разгара течения инфекции и на этапе завершения острого процесса появляются VСА 19. О поздней фазе течения инфекции свидетельствует обнаружение высокоспецифичного маркера VСА 22, который выявляется одиночно или совместно с EBNA-1 (р79). Последний белок длительно присутствует у лиц, переболевших инфекцией, и убедительно свидетельствует о перенесенной инфекции. Отмечается частое присутствие IgM-р45 и IgM-p79 при активном процессе, IgM-p43 и IgG-p27 коррелирует с тяжестью течения инфекции, а выявление IgM-p65, IgM-p33 – с наличием гепато- и спленомегалии. Для выявления антигенов ВЭБ в разнообразных пробах биоматериала могут быть использованы методы РИФ и РНИФ. Применение этой диагностики обеспечивает 100% обнаружения специфического маркера ВЭБ в лимфоцитах, однако при хроническом течении болезни возможны отрицательные результаты. Использование иммуноцитохимии или иммуногистохимии для выявлении антигенов ВЭБ нашло применение для диагностики ВЭБ-ассоциированных опухолей.

Выявление ДНК при диагностике ВЭБ может быть проведено в качественном или количественном формате. Определение ДНК ВЭБ проводят в различных биологических материалах: соскобах со слизистых оболочек, плазме, СМЖ и др. Наибольшее значение имеет обнаружение ДНК (особенно определение вирусной нагрузки) в плазме крови либо в соскобе ткани, взятой из носоглоточного кольца в раннем периоде заболевания. Количественное определение ДНК вируса Эпштейна – Барр в крови дает возможность отличить носительство (низкая концентрация вируса) от проявлений инфекционного процесса с активным размножением ВЭБ.

Показания к применению различных лабораторных исследований. При врожденной инфекции и реактивации персистирующей инфекции методом выбора является выявление ДНК ВЭБ в плазме крови и СМЖ. АТ IgM определяется редко. Рекомендуется определение АТ IgА к отдельным “ранним” АГ: EA-Rp93, EA-Dp45, EA-Dp43; капсидным АГ (СА): p125 (маркер ранней фазы), p65, p42, p41, p40, p33; р22 – маркер поздней фазы.

АТ-ВЭБ NA IgG появляются через 3–6 недель от начала болезни и сохраняются в течение всей жизни человека. Определение этих АТ имеет ретроспективное значение, применение его для обследования беременных и новорожденных не обосновано.

Интерпретация результатов. Наличие ДНК ВЭБ в плазме крови и СМЖ подтверждает активное течение инфекции. При обнаружении АТ IgM к вирусу Эпштейна – Барр в крови можно делать заключение об остром характере течения инфекции, в случае выявления низкоавидных, “ранних” АТ IgG – о реактивации вируса.

Однократный отрицательный результат обнаружения ДНК ВЭБ в слюне и клетках крови не исключает репликацию вируса в ЖКТ, костном мозге, коже, лимфоузлах и др., что обосновывает определение АТ IgM и IgА, наличие которых свидетельствует об активно текущей инфекции.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 – 2019

Центральный офис: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д.3а, метро "Шоссе Энтузиастов", "Перово"
+7 (495) 788-000-1, info@cmd-online.ru

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Этот возбудитель, называемый иначе вирусом герпеса человека 4 типа , относится к семейству Herpesvirida (герпесовирусов) и является одним из самых распространенных вирусов, встречающихся в организме людей. Он вызывает инфекционный мононуклеоз и, предположительно, играет большую роль в развитии онкозаболеваний, поэтому анализ на вирус Эпштейна-Барр должен сдавать каждый человек.

Как происходит заражение вирусом

Вирус Эпштейна-Барр передается:

• Традиционным контактным путем при непосредственном контакте со слюной (не зря инфекционный мононуклеоз называют иначе «болезнью поцелуев») .
• Через предметы, на которые попала слюна, например, в детских учреждениях — через игрушки и прочие предметы при несоблюдении правил их обработки и мытья.
• Иногда заражение может происходить при переливании инфицированной крови.

В человеческом организме возбудитель проникает в слизистые оболочки ротоглотки, где усиленно размножается, вызывая воспаление. Затем он проникает в кровь и с лимфотоком попадает в региональные лимфатические узлы, поражая В-лимфоциты и дендритные клетки, вызывая воспаление и гиперплазию. Позже возникает вирусемия с развитием генерализованного (общего) поражения лимфатической системы и внутренних органов.

Заболевания и осложнения, вызываемые вирусом Эпштейна-Барр

При попадании в организм человека этот возбудитель вызывает инфекционный мононуклеоз – заразное заболевание, сопровождающееся лихорадкой, сыпью, общим тяжелым состоянием, значительным увеличением лимфоузлов, поражением внутренних органов и длительным течением.

При благоприятном исходе возникает иммунитет и наступает период реконвалесценции с постепенным угасанием симптомов. В противном случае заболевание может перейти в хроническую форму, сопровождаясь носительством и стертой симптоматикой. Этот вариант неблагоприятен, так как на почве хронической инфекции в ирус может стать причиной лимфомы Беркета, назофарингальной карциномы, герпеса и других инфекций. При переходе в виромефетическое осложнение этот инфекционный агент вызывает поражение центральной нервной системы, внутренних органов и разрушает клетки мозга.

Когда и зачем проводится анализ на выявление вируса Эпштейна-Барр

На анализ направляет дерматолог, онколог, эндокринолог или терапевт.

Возбудитель вызывает заболевания, которые имеют очень разнообразную клиническую картину и плохо диагностируются. Это приводит к тому, что больного лечат совсем не от той патологии, которая у него имеется. Кроме того, имеет место и бессимптомное вирусоносительство, при котором человек не знает, что он болен, пока это не приведет к развитию онкопатологии.

Для выявления этого инфекционного агента в организме и проводится анализ на вирус Эпштейна-Барр, который помогает провести дифференциальную диагностику при подозрении на патологию.

Показания к проведению исследований:

• Диагностика инфекционного мононуклеоза в случае вялотекущих длительных тонзиллитов и немотивированного увеличения лимфоузлов.
• Диагностика стадий протекания болезни при инфекционном мононуклеозе.
• О пределения эффективности лечения при ВЭБ-инфекции.
• Обнаружение антител к вирусу при лихорадке, увеличении лимфоузлов и болях в горле, наступивших после переливания крови и пересадки тканей от донора.
• Дифференциальная диагностика герпетических инфекций.
• Подозрение на лимфому Беркета у пациентов, прибывших из зоны распространения этого заболевания.
• Диагностика новообразований у ВИЧ-инфицированных.

Виды анализов на вирус Эпштейна-Барр

Эти биохимические и молекулярные исследования позволяют выявить в крови больного антитела к ДНК вируса Эпштейна-Барр (EBV, Epstein-Barr virus DNA):

• ПЦР-реакция в режиме реального времени (Epstein Barr Virus, ДНК реал-тайм ПЦР) – результат может быть положительным или отрицательным. Проводится в течение всего периода лечения болезней, вызванных возбудителем.
• VCA -реакция на IgM капсидный белок (Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgM) – проводится на ранних стадиях инфекционного мононуклеоза.
• ЕА — реакция на ранние антигены IgG (Epstein Barr Virus ранние антигены (EA), IgG проводится для дифференциальной диагностики инфекций, сходных с инфекционным мононуклеозом.
• Количественная реакция на ядерный антиген (Epstein Barr Virus ядерный антиген (EBNA), IgG коэффициент позитивности).

Если показатели анализов выходят за предел допустимых референсных (допустимых, нормальных) значений, это значит, что нужно повторить исследование через 14 дней. При обнаружении ДНК возбудителя проводится повторный анализ через 30 суток для определения динамики лечения.

Так как при инфекционном мононуклеозе в организме образуются антитела Пауля–Буннеля, на их обнаружении основан один из видов лабораторной диагностики вируса. Кроме того, методом МФА определяются антитела к антигену вирусной оболочки:

• Высокий титр IgM –антител говорит о недавнем инфицировании, так как данный показатель максимален через две недели после начала болезни, а затем он снижается.
• Повышение титра IgG говорит о начале периода реконвалесценции. Показатель может оставаться довольно высоким еще некоторое время после выздоровления.
• Анти-EBNA IgG появляются уже практически после выздоровления, и могут находиться в организме даже через несколько лет после перенесенной инфекции. Их появление в крови человека, который еще болен, говорит о стихании острой фазы и начале периода выздоровления.

Подготовка к анализам

Особой подготовки для проведения исследований не требуется. Перед забором биоматериала нельзя курить в течение 30 минут. Исследование желательно проводить натощак, в утренние часы.

Обнаружение антител к ДНК возбудителя в синовиальной жидкости, биоптате и ликворе проводится в случае локальных поражений органов и сустав и делается путем исследования в лабораторных условиях соответствующих жидкостей.

Беременным перед проведением анализов проводится обследование на токсоплазмоз для исключения ложноположительной реакции.

Расшифровка анализа на обнаружение вируса Эпштейн- Барр

Информативность проведенных исследований на наличие этого возбудителя достаточна высока. Но при наличии еще какой-либо вирусной патологии нужно предварительно провести ряд дополнительных диагностических мероприятий на присутствие в организме наиболее вероятных возбудителей, а при взятии анализа во время беременности — на токсоплазмоз, чтобы понять причины возможного искажения результатов.

Референсные значения показателей исследований на вирус Эпштейна-Барр

Наименование исследования

Показатель

Значение

Примечание

Epstein Barr Virus, ДНК реал-тайм ПЦР

Информативен в течение всего времени, пока вирус находится в организме

Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA)

При недавнем заражении превышение нормы максимально

Epstein Barr Virus ранние антигены (EA), IgG

Наиболее эффективно проведение в начале заболевания

Epstein Barr Virus ядерный антиген (EBNA)

Повышенный показатель может сохраняться длительное время после выздоровления

Лабораторные показатели при ВЭБ

Как видно из таблицы, в разные сроки заболевания необходимо проводить различные исследования, поэтому пациентам приходится обследоваться несколько раз в течение заболевания.