Вирус эпштейна барр иммуноглобулин g

Исследование авидности иммуноглобулинов класса G ( IgG ) к вирусу Эпштейна – Барр – метод обследования, позволяющий определить степень эффективности специфического взаимодействия между молекулами антител и антигенов, скорость образования иммунного комплекса и полноту нейтрализации антигенов. Данный анализ используется для дифференциальной диагностики недавних случаев инфекции и ранее перенесенных форм у людей с повышенным титром антител ( IgG ) в крови; дифференциальной диагностики с ангиной, заболеваниями системы кроветворения; установления причины лихорадки неясной этиологии.

Определение индекса авидности иммуноглобулинов класса G к VCA ВЭБ позволяет уточнить сроки инфицирования и дифференцировать первичную инфекцию от реактивации и паст-инфекции.

Иммунохемилюминесцентный анализ – Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgG;

Иммуноферментный анализ – Определение авидности IgG к Epstein-Barr virus VCA.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирус Эпштейна – Барр (ВЭБ) – это ДНК-геномный вирус рода Lymphocryptovirus подсемейства Gammaherpesvirinae семейства Herpesviridae, имеет 4 основных антигена: ранний антиген (early antigen – ЕА), капсидный антиген (viral capcide antigen – VCA), мембранный антиген (membrane antigen – MA), ядерный антиген (Epstain-Barr Nuclea antigen – EBNA). Каждый из них образуется в определённой последовательности и индуцирует синтез соответствующих антител. ВЭБ поражает в основном два типа клеток: эпителий верхних дыхательных путей и пищеварительного тракта, а также В-лимфоциты, которые в результате инфицирования иммортализуются (становятся бессмертными). ВЭБ вызывает такие заболевания, как инфекционный мононуклеоз, злокачественная лимфома Беркитта, злокачественная носоглоточная карцинома. Вирус Эпштейна – Барр широко распространен в человеческой популяции. Как показали эпидемиологические исследования, инфицированность ВЭБ детей в возрасте до 5 лет в России составляет до 50 %, а взрослых – 95 %. Источником ВЭБ является больной человек или здоровый носитель. Вирус выделяется со слюной в продромальном периоде, в разгаре заболевания и при выздоровлении в период до 6 мес. Заражение здорового человека ВЭБ может осуществляться воздушно-капельным, контактно-бытовым и половым путями. Установлено, что он может передаваться при переливании донорской крови и других парентеральных вмешательствах. У людей без дефектов иммунной системы первичное инфицирование ВЭБ может протекать бессимптомно или вызывать субклинические проявления болезни с положительными серологическими реакциями. В дальнейшем вирус может длительное время персистировать в клетках хозяина в виде латентной инфекции. При массированном поступлении вируса или недостаточности иммунной системы развивается вирусемия, приводящая к острым формам заболевания. В процессе репликации вируса экспрессируется свыше 70 различных вирусоспецифических белков, однако к настоящему времени выделены группы иммуногенных белков, определение антител к которым дает возможность дифференцировать стадию инфекции. Наиболее специфичными и чувствительными маркерами ВЭБ-инфекции являются IgG и IgM к капсидному антигену (VCA), IgG к раннему антигену (ЕА) и IgG к ядерному антигену (NА).

Антитела к капсидному антигену ( VCA- IgG ) могут появиться очень рано (на 1-4-й неделе), обнаруживаются в большинстве случаев в начале заболевания, достигая пика ко 2-му месяцу. После выздоровления VCA IgG сохраняются пожизненно. Наличие VCA- IgG свидетельствует о перенесенной инфекции и о наличии иммунитета к вирусу. У детей до 7 лет антитела VCA- IgG могут не выявляться. Постоянное присутствие VCA- IgG в высоких титрах указывает на хроническую фазу инфекции. Отрицательный результат данного теста обычно исключает прошлую инфекцию, хотя не всегда исключает острую инфекцию, если анализ крови на вирус Эпштейна – Барр был произведен в раннем периоде острой фазы, когда VCA- IgG находятся ещё на неопределяемом уровне. Результат единичного теста сам по себе не может служить основанием для постановки диагноза, его следует рассматривать в комплексе с клиническими наблюдениями и данными других диагностических процедур.

Исследование авидности иммуноглобулинов класса G (IgG) к вирусу Эпштейна – Барр позволяет определить степень специфического взаимодействия между молекулами антител и антигенов.

Антитела, синтезированные клетками иммунной системы, обладают определенной способностью связываться с антигенами вируса. Прочность такого связывания антигенов с антителами называется авидностью – это общее свойство всех антигенов и антител, в том числе и вируса Эпштейна – Барр. Обычно авидность определяется для антител, принадлежащих к классу IgG, поскольку это позволяет определить длительность течения инфекции. Авидность антител других классов (IgМ) к вирусу Эпштейна – Барр не обладает клинической информативностью. Прочность связывания антигенов вируса Эпштейна – Барр и антител выражают индексом авидности, который обычно указывается в процентах и отражает, какое количество антител из их общего числа прочно связывается с антигенами вируса.

Для чего используется исследование?

• Лабораторное подтверждение инфекции ВЭБ при клинических подозрениях на инфекционный мононуклеоз;
• оценка стадии течения инфекции, лабораторное подтверждение диагноза при клинике хронического инфекционного мононуклеоза;
• подтверждение этиологической роли вируса Эпштейна – Барр при лимфопролиферативных и онкологических заболеваниях, связываемых с вирусом Эпштейна – Барр.

Когда назначается исследование?

• Комплексная диагностика острой инфекции ВЭБ и оценка стадии текущей инфекции;
• при выявлении у пациента лихорадки, боли в горле, увеличении лимфоузлов шеи, увеличении селезенки, печени, кожной сыпи, повышенной утомляемости;
• при симптомах гриппа у беременных женщин (наряду с тестами на цитомегаловирусную инфекцию, токсоплазмоз и др.);
• если пациент (даже без симптомов инфекции) находился в тесном контакте с больным инфекционным мононуклеозом – для оценки напряженности иммунитета и восприимчивости к инфекции.

Что означают результаты?

Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgG

Референсные значения: отрицательно.

Отношение signal / cut off: 0 – 0,9.

Причины положительного результата:

• наличие активного иммунитета вследствие ранее перенесенной инфекции (наряду с выявлением антител к ядерному антигену (EBNA) и отсутствием IgM к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна – Барр);
• текущий или недавно перенесенный инфекционный мононуклеоз (в сочетании с выявлением IgM к капсидному антигену (VCA) и антител к ранним антигенам (EA-D) вируса Эпштейна – Барр);
• реактивация вируса Эпштейна – Барр.

Причины отрицательного результата:

• отсутствие инфекции, вызванной вирусом Эпштейна – Барр (IgM к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна – Барр не выявляются); если есть подозрение на инфекцию, целесообразно повторное определение IgG через 2-4 недели;
• ранние стадии инфекционного мононуклеоза (при условии что выявляется повышение уровня IgM к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна – Барр) – повторить исследование в динамике через 14 дней;
• низкое содержание вируса Эпштейна – Барр в крови;
• отсутствие иммунного ответа или слабый иммунный ответ к вирусу Эпштейна – Барр вследствие нарушений в иммунной системе (IgM к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна – Барр не выявляются).

Определение авидности IgG к Epstein-Barr virus VCA

Единицы измерения : результаты приводятся в виде индекса авидности (ИА), %.

Индекс авидности менее 60 % – низкоавидные антитела VCA – IgG . Наличие низкоавидных антител свидетельствует об острой стадии первичной инфекции либо о недавней (несколько недель) первичной инфекции в анамнезе.

Индекс авидности 60-70 % – пограничная авидность (серая зона). Пограничный результат ИА указывает на позднюю первичную либо раннюю паст-инфекцию.

Индекс авидности более 70 % – высокоавидные антитела VCA – IgG . Наличие высокоавидных VCA-IgG при отсутствии VCA-IgМ указывает на паст-инфекцию. Наличие высокоавидных VCA-IgG при наличии VCA-IgМ предполагает либо реактивацию вируса, либо позднюю первичную инфекцию.

На ранней стадии первичной инфекции IgG к VCA характеризуются низким индексом авидности (ИА). В течение нескольких недель происходит созревание антител и возрастание ИА. На стадии паст-инфекции в сыворотках крови пациентов выявляются уже высокоавидные IgG к VCA.

Кто назначает исследование?

Инфекционист, педиатр, ЛОР, гематолог, терапевт, врач общей практики.

• Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgM
• Epstein Barr Virus, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Epstein Barr Virus ранние антигены (EA), IgG
• Epstein Barr Virus ядерный антиген (EBNA), IgG (количественно)
• HIV 1, 2 Ag/Ab Combo (определение антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена p24)

Литература

1. Набор реагентов для иммуноферментного определения индекса авидности иммуноглобулинов класса G к капсидному антигену VCA вируса Эпштейна-Барр в сыворотке (плазме) крови, ВектоВЭБ-VCA-IgG-авидность. – Инструкция по применению. – 2014г

2. Инфекционные болезни у детей. Ред. Д. Марри. М. Практика, 2006. – 928 с.

3. Tselix A. Epstein-Barr virus / A. Tselix, Jenson H.В. – NY : Taylor & Fransis, 2006.

Где проводится: Тонус

Срок выполнения: 4 рабочих дня

+ Забор материала 200 руб.

+ Забор анализа на дому у взрослого (только Нижний Новгород) 200 руб.

Вирус Эпштейна-Барр (вирус герпеса человека 4 группы) – микроорганизм, который поражает B-лимфоциты и вызывает у человека острое инфекционное заболевание – инфекционный мононуклеоз. Данный вирус также связывают с возникновением онкологических заболеваний — назофарингеальной карциномы, болезни Ходжкина, лимфомы Беркитта, волосистой лейкоплакии и др.

Вирус Эпштейна-Барр имеет широкое распространение – во многих странах более 95 процентов населения были инфицированы данным вирусом и имеют антитела к нему. Инфицирование вирусом происходит чаще в детском и подростковом возрасте.

Вирус Эпштейна-Барр передается от человека к человеку, чаще всего это происходит через слюну. Проникая через эпителий полости рта, слюнных желез, горла вирус попадает в системный кровоток, после чего проникает внутрь B-лимфоцитов и стимулирует их размножение. При этом происходит увеличение лимфоузлов, миндалин, селезенки. Если иммунитет человека нормальный, то постепенно организм освобождается от вируса и клиническая картина стихает. Вирус Эпштейна-Барр способен в латентном виде отставаться в организме и бессимптомно реактивироваться при снижении иммунитета.

При иммунодефицитных состояниях (терапии иммуносупрессорами, у ВИЧ-инфицированных) микроорганизм может вызывать онкологические заболевания. Обычно первичное инфицирование происходит без появления клинических симптомов или проявляется тонзиллитом, фарингитом.

Инкубационный период инфекционного мононуклеоза составляет 4-6 недель.

Продромальный период характеризуется появлением миалгий, утомляемостью, недомоганием. Позднее возникает повышение температуры, увеличение лимфоузлов, боль в горле, гепатоспленомегалия. Возможно появление сыпи на руках и туловище. Данные симптомы могут сохранятся две — четыре недели.

Анализ крови при этом заболевании характеризуется появлением атипичных мононуклеаров (более 10 процентов). Также в лабораторных исследованиях обнаруживаются нарушения функции печени.

NA IgG к вирусу Эпштейна-Барр – антитела, указывающие на перенесенную инфекцию или хронически протекающую инфекцию, вызванную данным вирусом. Антитела IgG к нуклеарному антигену вируса Эпштейна-Барр в очень редких случаях обнаруживаются во время острой инфекции. Эти иммуноглобулины появляются спустя 4-6 месяцев после инфицирования (даже если патология протекала в стертой форме), после этого они могут выявляться пожизненно. NA IgG к вирусу Эпштейна-Барр являются маркерами паст -инфекции. Паст инфекция – это хроническая латентная ВЭБ инфекция, которая возникает у здоровых людей.

Ядерный антиген (NA) обнаруживается во всех клетках, которые были изменены этим микроорганизмом, в том числе и в клетках опухоли, которая возникла под действием данного вируса.

Для точной диагностики необходимо определение IgG к нескольким антигенам: антигенам вирусного капсида (VCA), ранним антигенам (ЕA) и ядерным антигенам (NA). Это позволит врачу выяснить является ли заболевание текущим на данный момент, недавним или перенесенным.

Если NA IgG к вирусу Эпштейна-Барр отсутствуют, но при этом удается выявить IgM, то это указывает на первичную инфекцию.

Положительный анализ на NA IgG к вирусу Эпштейна-Барр и выявление увеличение уровня AE-антител может указывать на обострение латентной инфекции. Как правило, при паст-инфекции обнаруживаются IgG к антигену капсида и ядерному антигену.

Специальная подготовка не требуется. Не рекомендуется принимать пищу за 4 часа до взятия крови.

• Подтверждение диагноза при подозрении на инфекционный мононуклеоз
• Определение текущей стадии ВЭБ-инфекции
• Обследование онкологических больных и пациентов с лимфопролиферативными заболеваниями, которые могли возникнуть в результате инфицирования вирусом Эпштейна-Барр

Положительный результат теста определяется при:

• Инфицировании ВЭБ ранее (прошло более шести месяцев)
• Реактивация инфекции
• Активации хронической ВЭБ инфекция

Отрицательный результат теста определяется в следующих случаях:

• Инфицирования ВЭБ-инфекцией нет
• Взятие крови проводилось в инкубационный период или ранний период инфицирования.

Интерпретация результатов проводится по результатам всех тестов на антитела к антигенам вируса Эпштейна-Барр: NA IgG (ядерным антигенам), ранним антигенам ЕA IgG, антигенам вирусного капсида VCA IgG и IgM.

С помощью серологического метода можно определить антитела к вирусу Эпштейна-Барр. Такой способ диагностики позволяет судить о стадии течения заболевания и реакции иммунной системы. Появление различных классов антител происходит в определенной последовательности, которая давно изучена.

Антигенная структура вируса

После попадания в организм вируса иммунные клетки начинают выделять антитела. Они являются специфическими белками, которые реагируют с определенным антигеном. Антиген — это белок, полисахарид или нуклеиновая кислота, которая принадлежит другому организму и воспринимается как чужеродное вещество. Антитела выделяются лимфоцитами. Они прикрепляются к антигену и блокируют его. Так развивается ответная иммунная реакция.

Каждый возбудитель имеет свою антигенную структуру. У вируса Эпштейна-Барр она представлена следующими веществами:

• S-антиген, является специфическим для данной группы микроорганизмов, это протеины нуклеокапсида — ядерной оболочки вируса.
• V — специфичен для определенного типа микроорганизмов, образован гликопротеинами внешней оболочки. Эти два антигена характерны для семейства герпесвирусов.
• Ранний антиген (ЕА).
• Мембранный (МА) — определяется на поверхности зараженной клетки.
• Комплемент, связывающий ядерный антиген (EBNA).
• Капсидный антиген (VCA) — поздний антиген.

К ядерному и капсидному антигену вируса определяются антитела, принадлежащие к иммуноглобулинам классов М и G.

Порядок образования антител

Иммуноглобулины — специфические белки лимфоцитов. После появления в крови вируса и его антигенов лимфоциты начинают вырабатывать Ig. Первыми регистрируют иммуноглобулины, принадлежащие к классу М, которые синтезируются к раннему и капсидному антигену. Анти-VCA IgM могут определяться еще до появления клинических симптомов и в начале болезни. Высокие концентрации регистрируются на 1—6 неделе после попадания в кровь возбудителя, но уже с 3 недели постепенно начинают снижаться. Полностью исчезают в крови не ранее, чем через 1—6 месяцев после выздоровления.

Иммуноглобулины к раннему антигену появляются в острый период и исчезают быстро после выздоровления. Высокие концентрации сохраняются при обострении, а также у больных онкологическими заболеваниями, при аутоиммунных процессах и иммунодефицитных состояниях.

IgG выделяются к капсидному антигену, появляются рано — на 1—4 неделе болезни. Максимальное значение достигается ко 2 неделе, сохраняются пожизненно в более низкой концентрации. У детей младше 7 лет могут не определяться после перенесенного заболевания. Постоянные высокие титры VCA IgG говорят о хронической инфекции. Если в анализах получился отрицательный результат, то это может говорить об отсутствии контакта с вирусом или о том, что кровь взяли в раннем периоде, когда антитела еще не выработались в нужном количестве.

Результат анализа не может быть единственным основанием для диагноза. Необходимо сопоставлять его с симптомами и другими исследованиями.

Определение антител к ядерному антигену вируса можно проводить в период выздоровления. В острую фазу болезни они еще не синтезируются. Только на 3—12 месяц может быть положительная реакция на EBNA IgG. Определяться они могут на протяжении многих лет. Если в анализах нет нуклеарного антитела класса G, но присутствуют положительные капсидные IgM, то можно судить о существовании инфекции в данный момент. Если происходит реактивация возбудителя, то нуклеарный IgG снова увеличивается.

Определение антител к капсидному антигену

Антитела к VCA Ig определяются методом хемолюминесцентного иммунного анализа. Для интерпретации анализа опираются на величину 20,0 Ед/мл. Если определяется количество антител меньше, чем это число, то результат отрицательный, равное или большее количество — положительный. Если количество антител не определяется или указывает на отрицательный результат, то это не всегда отсутствие контакта с вирусом, в некоторых случаях такой результат говорит об острой фазе болезни. Чтобы исключить подозрения, через 10—14 нужно повторить анализ и дополнительно сдать на IgM.

Анализ на антитела к ядерному антигену

Анализ выполняют в срок до 5 дней. Используется также хемолюминесцентный анализ. Результаты интерпретируют в зависимости от полученных чисел:

• менее 5 Ед/мл — отрицательный результат;
• от 5 до 20 Ед/мл — сомнительный результат;
• более 20 Ед/мл — положительный результат.

Большие концентрации IgG против вируса Эпштейна-Барр говорят о положительном результате и об острой инфекции. Отрицательный результат при аналогичных иммуноглобулинах M и G говорит об отсутствии болезни. Увеличение IgG к ядерным антителам в фазу острой инфекции — показатель выздоровления. Концентрация иммуноглобулинов 5—20 Ед/мл говорит о том, что, скорее всего, контакт с возбудителем был в прошлом. Повторное исследование проводят через 2 недели.

Показания для исследования и подготовка к анализам

Для проведения исследования врач определяет необходимость проведения диагностики. Показаниями служат:

• подтверждение диагноза мононуклеоза;
• оценка эффективности лечения;
• определение стадии развития болезни;
• у больных раком для выявления причины патологии, связанной с вирусом Эпштейна-Барр.

Для подготовки к анализу необходимо прийти натощак в лабораторию. Последний прием пищи должен был быть не позднее 20 часов вечером. За сутки до проведения анализа исключают алкоголь, жирную пищу, физические нагрузки и стресс.

Исказить результат анализа могут хилез (большое содержание жиров в крови), гемолиз пробы крови (распад клеток), получение лучевого лечения и химиотерапии. Правильно выполненный анализ после соответствующей подготовки помогает сопоставить клинические данные с его результатом и не ошибиться с диагнозом.