Оплодотворение яйцеклетки эко

Как происходит развитие эмбриона вне организма матери во время ЭКО

Сегодня все знают, что беременность, наступившая после экстракорпорального оплодотворения, ничем не отличается от естественной. Но одно важное отличие все же существует – первые несколько дней будущий малыш проводит вне материнского организма, в той самой «пробирке».

Что происходит с эмбрионом в эти важные сутки?

День 0

«Нулевым днем» считается момент забора яйцеклетки, готовой к оплодотворению. В ходе пункции из фолликула отбирается жидкость, содержащая яйцеклетки. Сами ооциты (собственно, яйцеклетки), отделяются от фолликулярной жидкости в лаборатории. Специалист помещает их в особую питательную среду, внимательно изучает и, убедившись что клетки не повреждены, через несколько часов помещает их в концентрированную сперму (либо отправляет на криозаморозку, чтобы использовать в будущем).

День 1

Приблизительно через 16-20 часов после того, как яйцеклетка была помещена в среду сперматозоидов, эмбриолог проводит оценку оплодотворения. Как он определяет, возможно ли зарождение новой жизни? По пронуклеусам, или предшественникам ядра: в оплодотворенной яйцеклетке их должно быть два. Один содержит генетический материал матери, другой – отца. Если в яйцеклетке оказывается один, три или вовсе ни одного пронуклеуса, то такая клетка выбраковывается.

” Пронуклеусы еще располагаются на некотором расстоянии, но постепенно движутся навстречу друг другу, и итогом этой встречи станет зигота – первая клетка будущего человека, содержащая полный двойной набор хромосом. Впрочем, это вопрос не первого, а второго дня…

День 2

Именно на второй день можно говорить о том, что из яйцеклетки и сперматозоида образовалась новая жизнь: произошло первое дробление зиготы, и будущий малыш – это две-четыре клетки-бластомера. Бластомеры, возникающие при первоначальном делении зиготы – не совсем обычные клетки: они обходятся без стадии клеточного роста, то есть эмбрион состоит из всё большего числа клеток, а вот его размер почти не увеличивается.

” Это очень важный день для мамы и будущего малыша: в этот момент происходит первый (а иногда и единственный) отбор эмбрионов для имплантации. Об их жизнеспособности судят по объему безъядерных фрагментов: чем их меньше, тем лучше.

Специалисты различают четыре типа эмбрионов.

Тип А — эмбрион отличного качества без ануклеарных (безъядерных) фрагментов.

Тип В — эмбрион хорошего качества с содержанием ануклеарных фрагментов до 20%.

Тип С — эмбрион удовлетворительного качества с содержанием ануклеарных фрагментов от 21% до 50%.

Тип D — эмбрион неудовлетворительного качества с содержанием ануклеарных фрагментов более 50%.

День 3

Эмбриологи – эмбриологами, но у природы есть свой, естественный отбор. На третий день эмбрион, развивавшийся до этого «по инерции», на материнском генетическом материале, активирует собственный геном. Если в нем имеются грубые нарушения (по разным данным – таких эмбрионов от 4 до 18%), то развитие останавливается.

” Развивайся эмбрион в организме будущей мамы, в этот день он бы вышел из фаллопиевой трубы в полость матки. Конечно, возникает вопрос, комфортно ли ему «in vitro», «в стекле», так же, как было бы в естественной среде?

В начале прошлого века эмбрионы пытались культивировать в физрастворе, и эта среда, действительно, оставляла желать лучшего. «Лучшее» появилось в 1985 году, когда в среду для выращивания эмбрионов впервые добавили растворимый белок альбумин. С тех пор среда, в которую помещали эмбрионы, непрерывно совершенствовалась и усложнялась.

День 4

Ранее эмбрион был хаотичным скоплением клеток, но на четвертый день он – уже морула. Morula в переводе с латыни – шелковица, и действительно, клетки формируют плотный ровный шар, напоминающий ягоду этого растения, или, если хотите, малины. Пространства между отдельными клетками становится меньше, поверхность «ягодки» сглаживается, внутри намечается полость – эмбрион готовится прикрепляться к стенке матки.

” Поскольку при естественном течении беременности эмбрион в этот момент находится в матке, а не в фаллопиевой трубе, ему требуется уже другая внешняя среда. Долгое время считалось, что можно искусственно выращивать эмбрион только до четвертого дня, однако сегодня, чтобы выиграть еще пару суток, его просто помещают в новую среду.

День 5

Морула меняется не по дням, а по часам. Вскоре половина ее объема составляет полость, а клетки, из которых она состоит, состоят из внешнего слоя трофобласта (он отвечает за внедрение в ткань матки и образование плаценты) и плотной клеточной массы – собственно, будущего малыша. Теперь это уже не морула, а бластоциста. При естественном течении беременности полость бластоцисты медленно расширяется, внешняя оболочка рвется, и начинается процесс имплантации, на который потребуется еще день или два.

” Ученые до сих пор не пришли к единому мнению, почему при искусственном оплодотворении до стадии бластоцисты «доживает» только около 40% эмбрионов: виной ли тому искусственная среда обитания, или это проявление генетической неполноценности некоторых из них. Но, в любом случае, выживают только лучшие из лучших, да и среди них врачи продолжают вести тщательный отбор. На этот раз – посредством генетического анализа: эмбрион уже достаточно велик, чтобы можно было изъять из него несколько клеток и проверить на генетические заболевания.

Когда лучше подсаживать эмбрион?

Подсадка возможна в любой день, с первого по шестой, и каждого выбора есть свои плюсы и минусы. Если поместить эмбрион в матку рано, на первый или второй день, то возможное негативное влияние искусственной среды будет минимизировано, но ведь и полость матки на таком сроке для будущего малыша не «дом родной», он должен был бы еще находиться в маточной трубе! К тому же на таком сроке еще невозможно оценить ни качество эмбриона, ни его подверженность генетическим заболеваниям.

На третий день можно уже уверенно отсеять нежизнеспособные эмбрионы, однако, для генетического анализа по-прежнему еще очень рано.

На четвертый, а особенно на пятый день оценить можно все: и жизнеспособность эмбриона, и генетические заболевания, которые он унаследовал. Наконец, именно в этот момент естественно зачатый малыш, а вернее – бластоциста, из которой он вы итоге разовьется, оказывается в полости матки. Так что именно в этот момент подсадка эмбриона наиболее удобна и естественна.

Плохо то, что к этому моменту искусственно оплодотворенные яйцеклетки уже несколько дней борются за жизнь «в пробирке» и больше половины в ходе этого жестокого соревнования «сходят с дистанции». Среди неудачников не только жертвы генетических мутаций, но и вполне здоровые и качественные эмбрионы, которые по неизвестным причинам замирают и останавливаются в своем развитии. Так что к часу «Х» может попросту не дожить ни один эмбрион.

” Так что врачи при выборе дня имплантации руководствуются целым рядом критериев. Если ранее уже были неудачные попытки ЭКО, то обычно пытаются перенести в полость матки «более юные» эмбрионы – третьего или даже второго дня развития, надеясь, что в естественной среде их выживаемость будет выше. Если существует вероятность генетических заболеваний, то подсадку эмбриона стараются оттянуть до того момента, когда будут сделаны достоверные анализы.

Именно поэтому, хотя идеальным днем для подсадки мог бы стать день №4, ее осуществляют только на следующий день, или даже через день.

Наконец, еще один фактор, который приходится учитывать, – психологическое состояние мамы. Чем дольше она ждет переноса эмбриона, тем больше нервничает, и тем меньше шансы на удачную берменность.

Дорогие будущие мамы! Не нервничайте! Мы верим – все у нас получится!

Человеческому любопытству нет предела. Даже о самых обыденных вещах хочется знать в мельчайших подробностях. Что уж говорить о проведении экстракорпорального оплодотворения. Хочется понимать как можно больше, особенно тем, кому пришлось с этим столкнуться. В этой статье – детальная информация о том, как происходит развитие эмбриона по дням после ЭКО.

Эмбриологический этап

Главным действующим лицом на этом этапе становится врач-эмбриолог. Эмбриологический этап – самый важный в циклах экстракорпорального оплодотворения. От его правильности зависит успешноcть всей процедуры.

Для культивирования яйцеклеток и эмбрионов нужны особые условия – оптимальное соотношение:

Сочетание заданных условий возможно только в специальных инкубаторах. Выбранные параметры в них поддерживаются автоматически. В период до 5 дней эмбрионы будут развиваться в инкубаторе.

К средам, в которыхкультивируются эмбрионы, тоже жесткие требования. Они должны имитировать внутреннюю среду женского организма.

Во время трансвагинальной пункции эмбриолог занят поиском ооцит-кумулюсных комплексов, в которых и находятся сами яйцеклетки. Фолликулярную жидкость, после изучения под микроскопом, переливают в чашки Петри. Даже невооруженным взглядом можно рассмотреть эти комплексы, содержащие яйцеклетку. Это слизистые комочки, диаметром 5–10 мм. До момента оплодотворения они содержатся в специальной питательной среде.

Параллельно в это время происходит обработка спермы. Задача при обработке спермы – выделить фракцию самых активных, морфологически нормальных, подвижных сперматозоидов, наиболее способных к оплодотворению.

На эмбриологическом этапе проводится оплодотворение, как правило, спустя 4–6 часов после трансвагинальной пункции. В чашку Петри с яйцеклеткой добавляется концентрат сперматозоидов в количестве 100000 на 1 яйцеклетку. При неудачных предыдущих попытках ЭКО и аномалиях сперматозоидов у супруга доктор рекомендует ИКСИ.

Развитие эмбрионов после ЭКО по дням

День первый

День проведения пункции и извлечения женских половых клеток считается нулевым. Через 12–16 часов после оплодотворения можно наблюдать стадию зиготы – ооцита с двумя пронуклеусами (клеточными ядрами): женским и мужским.

Зигота имеет уже двойной набор хромосом – присутствуют гены от маминого и папиного организма. Наличие двух клеточных ядер расценивается так, что оплодотворение произошло успешно. Остальные клетки, не соответствующие этому критерию отбраковываются.

День второй

На вторые сутки клетки эмбриона делятся и называются бластомерами. В норме на вторые сутки должно быть от 2 до 4 бластомеров.

Каждый день эмбриологом ведется фиксирование качества эмбрионов. Все его недостатки и достоинства описываются в протоколе. Это помогает эмбриологу выбрать «правильный» эмбрион и время переноса.

День третий

На третьи сутки эмбрион, продолжая развиваться, уже имеет 6-8 бластомеров. В этот день, при наличии нарушений и существенных ошибок в геноме, эмбрионы могут останавливаться в своем развитии. Наступает «блок развития». В геноме содержится информация, отвечающая за поддержание и построение организма. Поэтому прекращение развития напрямую зависит от того, какой геном был создан и как сформирован во время оплодотворения.

День четвертый

На четвертые сутки формирования эмбрион состоит из 10-16 бластомеров. Начинается процесс компактизации: межклеточные связи становятся плотнее, форма ровнее. Наступает стадия морулы. В норме в женском организме именно на этом этапе эмбрион попадает из трубы в матку. К концу четвертых суток развития внутри морулы начинает формироваться полость и инициируется процесс кавитации – разделение клеток на две группы, каждая из которых будет выполнять свою функцию.

С того момента, как полость занимает более 50% объема эмбриона, стадия называется бластоциста.

День пятый

Продленное культивирование до 5-6х суток часто рекомендуется докторами. Цель такого культивирования – достижение эмбрионами стадии бластоцисты. Доказано, что при переносе бластоцисты значительно увеличивается шанс имплантации. Это дает возможность врачу выделить один самый качественный эмбрион и избежать многоплодия.

Когда полость достигает значительного размера, оболочка истончается и начинается процесс хетчинга – эмбрион покидает свою защитную оболочку. После чего он уже готов к имплантации. Внешне этот процесс напоминает «вылупление» птенца из яйца. В ситуации, когда хетчинг естественным путем не происходит, эмбрион лишен способности к имплантации, рекомендуется процедура вспомогательного хетчинга.

Качество эмбрионов при ЭКО

Перенос эмбрионов реализуется на 2, 3 или 5, 6 сутки. Это зависит от количества и качества эмбрионов. При ЭКО на перенос выбираются эмбрионы отличного и хорошего качества.

Морфологические критерии отбора:

• количество клеток, соответствующее дню развития;
• отсутствие или минимальный процесс фрагментации;
• сферичные и равные по размеру бластомеры.

На самом деле критериев определения качества эмбрионов при ЭКО больше. Нами приведены самые основные.

О том, как развиваются эмбрионы после переноса, уже в полости матки, можно узнать в этой статье.

Как вам уже известно, ЭКО практически повторяет природные процессы зачатия, поэтому и этапы программы ЭКО вполне логично следуют один за другим.

• Оглавление
• Цены

Поговорим о том, как происходит оплодотворение. ЭКО проходит семь этапов. Все этапы ЭКО мы сейчас рассмотрим.

Первый этап

Оба партнера должны пройти обследование перед ЭКО в соответствии с требованиями, принятыми законодательством РФ. Консультация репродуктолога – первое с чего начинается лечение: пара получает направления на обязательные анализы и консультации специалистов, а также, при необходимости, врач рекомендует проведение дополнительного обследования.

На этом этапе врач подбирает индивидуальный протокол лечения для данной пары, объясняет пациентам суть предстоящего лечения, информирует о возможных рисках и осложнениях на различных этапах проведения процедуры ЭКО.

Второй этап – индукция овуляции

Если по результатам обследования не выявлено никаких противопоказаний, то практически сразу после начала менструального цикла пациентка начинает получать специальные лекарства (гонадотропины). Эти препараты стимулируют развитие нескольких яйцеклеток в яичниках.

В отличие от естественного цикла, когда за один месяц созревает только один фолликул с одной яйцеклеткой, во время индукции овуляции идет рост сразу большого числа фолликулов. Много яйцеклеток нужно получить, так как не все они оплодотворятся или будут правильно развиваться в дальнейшем.

Созревание яйцеклеток занимает несколько дней. Сколько длится этот процесс, зависит от схемы стимуляции.

Контроль осуществляется при помощи УЗИ. Когда фолликулы достигнут нужного размера, а яйцеклетки практически созреют, пациентке вводится препарат (хорионический гонадотропин) для индукции овуляции.

Третий этап – получение яйцеклеток

На какой день цикла делают аспирацию ооцитов, зависит от выбранного протокола ЭКО. Через 36 – 48 часов после введения хорионического гонадотропина созревшие яйцеклетки должны быть извлечены из яичников. Для этого женщине проводят процедуру по забору яйцеклеток. Эта манипуляция проводится в операционной под наркозом.

Несколько слов о том, как происходит забор яйцеклеток при ЭКО. Специальной тонкой иглой, под контролем трансвагинального ультразвука, производится пункция яичника через верхнюю стенку влагалища.

Путем последовательной пункции каждого фолликула получают все созревшие яйцеклетки. Операция длится от 10 до 20 минут. Если полученные яйцеклетки очень низкого качества, или у пациентки невозможно их получить, то можно использовать донорские ооциты.

В клинике «АльтраВита» используют яйцеклетки доноров, которые сохраняют витрификацией – современным методом криоконсервации. Замораживание происходит практически мгновенно, что наименьшим образом может сказаться на качестве замороженных клеток.

Мгновенное замораживание дает возможность избежать фазы кристаллообразования, во время которой клеточные мембраны обычно и повреждаются, чтобы этого достичь, необходимо использовать большое количество криопротекторов.

Четвертый этап – получение и обработка спермы

В день забора яйцеклеток у пациентки производится забор спермы у ее партнера. Сперму получают путем мастурбации, но при некоторых заболеваниях может потребоваться биопсия яичка или операция, чтобы извлечь сперму непосредственно из яичка.

Полученный образец спермы отделяется от семенной жидкости в лаборатории. При низком качестве спермы и малой подвижности сперматозоидов пациентам предлагают процедуру ЭКО с ИКСИ. А при абсолютном мужском бесплодии паре предлагается воспользоваться спермой донора. В клинике «АльтраВита» имеется крупнейший банк донорской спермы.

Все доноры проходят предварительное тщательное обследование и использование их спермы абсолютно безопасно.

Пятый этап ЭКО – экстракорпоральное оплодотворение

Этот этап (собственно, процесс ЭКО) проводится в специально оборудованной лаборатории. Процедуру ЭКО проводит врач эмбриолог.

Как происходит оплодотворение?

Почти так же, как в естественных условиях, только с большей вероятностью успеха. Для того чтобы создать благоприятные условия используют специальные многоэтапные питательные среды. Они имеют различный состав, который соответствует условиям в разных отрезках маточной трубы. Чтобы полностью воссоздать процесс перехода яйцеклетки от яичника к матке, эмбриолог ежедневно осматривает эмбрионы и меняет питательную среду.

Когда получены яйцеклетки и сперматозоиды, их смешивают и помещают в первую питательную среду. Это самый распространенный способ оплодотворения. При наличии мужского фактора бесплодия могут использоваться дополнительные процедуры для наступления оплодотворения – ИКСИ, ИМСИ, насум. Их проводят под многократным увеличением специальной аппаратуры с микроманипуляторами.

За какое время оплодотворяется яйцеклетка?

Это занимает 16-18 часов, в результате чего образуется зигота, которая делится через 2-4 часа. С этого момента формируется эмбрион.

Шестой этап – культивирование эмбрионов

Если все процессы протекают правильно, то в течение двух суток формируется четырех-клеточный эмбрион, к четвертым суткам он преобразуется в морулу, а на пятые сутки – в бластоцисту – многоклеточную структуру с полостью, содержащую жидкость внутри.

Именно на этом этапе проводится предимплантационная генетическая диагностика (ПДГ), которая позволяет выяснить, нет ли у полученного эмбриона генетического заболевания, переданного от родителей, исключить синдром Дауна и другие хромосомные аномалии, а также узнать пол будущего ребенка.

Для проведения данного исследования требуется всего одна клетка, что практически не несет отрицательного воздействия при ее заборе на дальнейший рост и развитие эмбриона.

Данная методика дает возможность избежать подсадки аномального эмбриона, что является единственным возможным способом рождения здорового потомства у пар с генетическим вариантом бесплодия. ПДГ также рекомендуют проводить парам в возрасте, так как у них повышается риск возникновения генетических аномалий.

Передовые технологии, современное оборудование, многолетний опыт в совокупности с высококвалифицированными врачами-генетиками дают право считать клинику «АльтраВита» одной из самых лучших в проведении предимплантационной генетической диагностики. Неоспоримым доказательством этого факта является рождение здоровых детей у пациентов клиники.

Седьмой этап – перенос эмбриона

На 3-5 сутки сформировавшийся эмбрион переносят в полость матки. День переноса во многом зависит от особенностей его роста и необходимости дополнительных процедур – его определяет врач эмбриолог.

Как правило, переносят не более двух эмбрионов для избежания многоплодной беременности и предупредить связанные с этим осложнения после ЭКО. Предпочтительнее всего переносить только один эмбрион, тогда риски после ЭКО минимальны и сопоставимы с таковыми при беременности, наступившей естественным путем.

Как показывает мировая и отечественная многолетняя практика, успех наступления беременности после ЭКО практически не зависит от количества перенесенных эмбрионов и в большей мере связан с их качеством.

Многоплодие несет в себе много проблем в период вынашивания беременности и родов. Вероятность осложнений возрастает с увеличением количества прижившихся в матке эмбрионов. Одной из наиболее частых проблем при многоплодии являются преждевременные роды, рождение маловесных детей или мертворождение. Процедура переноса производится амбулаторно в кабинете гинеколога и не требует обезболивания.

Если в результате ЭКО получено более одного эмбриона, остальные, которые не планируют переносить в матку, подвергают криоконсервации путем витрификации. Если первый цикл ЭКО завершился неудачей, то в следующий раз процедуру сразу начинают сразу с седьмого этапа – криопереноса.

Сохраненных при помощи мгновенной заморозки эмбрионов специальным образом размораживают, еще несколько дней культивируют и после этого переносят в матку. Есть множество исследований, показавших, что беременности после криопереноса возникают чаще, протекают благоприятнее и в большем проценте случаев заканчиваются рождением ребенка.

Вероятно, это связанно с тем, что после витрификации во время размораживания выживает большее число эмбрионов, чем при использовании медленного замораживания.

Витрифициованные эмбрионы могут храниться на протяжении десятков лет. При желании пациенты могут заключить с клиникой договор на хранение эмбрионов, чтобы впоследствии использовать, если решат иметь второго ребенка, их в новом протоколе ЭКО.