Оплодотворение методом икси

Экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО), то есть оплодотворение вне организма женщины, используется в случаях невозможности беременности посредством других методов.

p, blockquote 1,0,0,0,0 –>

p, blockquote 2,0,0,0,0 –>

Для достижения этой цели применяется одна из методик ЭКО — процедура ИКСИ (ICSI —Intra Cytoplasmic Sperm Injection), означающая (в переводе с английского языка) «внутрицитоплазматическое введение сперматозоида». Согласно статистике, она необходима у 70% пациентов, нуждающихся в ЭКО.

p, blockquote 3,0,0,0,0 –>

p, blockquote 4,0,0,0,0 –>

Метод ИКСИ — что это?

p, blockquote 5,0,0,0,0 –>

Процесс ЭКО заключается в получении яйцеклетки, созревшей при естественном или стимулированном менструальном цикле, оплодотворении ее и переносе одного или двух наилучших эмбрионов в полость матки, в результате чего ожидается наступление беременности.

p, blockquote 6,0,0,0,0 –>

При классическом ЭКО полученные яйцеклетки смешиваются в пробирках со сперматозоидами, которые в процессе оплодотворения самостоятельно преодолевают три барьера ооцита:

p, blockquote 7,0,0,0,0 –>

• слой клеток лучистого венца;
• блестящую оболочку, в области которой множество погибающих мужских половых клеток выделяют фермент гиалуронидазу; она растворяет участок блестящей оболочки яйцеклетки, чем способствует проникновению одного из сперматозоидов;
• непосредственно оболочку клетки.

Так при определенных условиях и происходит самостоятельное оплодотворение.

p, blockquote 8,0,0,0,0 –>

Микроманипуляционный метод ИКСИ при ЭКО сводится к искусственному преодолению всех трех барьеров на пути одного сперматозоида. Для проведения процедуры необходимы соответствующие реактивы, специальная дорогостоящая аппаратура с манипуляторами и обученные специалисты-эмбриологи.

p, blockquote 9,0,0,0,0 –>

p, blockquote 10,0,0,0,0 –>

Когда и как проводится процедура ИКСИ?

Инвертированный микроскоп для процедуры ИКСИ

Она осуществляется посредством электрического или гидравлического микроманипулятора высокой точности, позволяющего осуществлять ручные манипуляции под инвертированным микроскопом, и стеклянных инструментов — инъекционной иглы-микропипетки и микроприсоски-капилляра.

p, blockquote 11,0,0,0,0 –>

Принцип процедуры ИКСИ заключается, в отличие от классического ЭКО, в использовании не всех полученных сперматозоидов и нескольких яйцеклеток, а в отборе по морфологическим признакам созревшей и подготовленной яйцеклетки и единственного интенсивно активного (в плане поступательных движений) и полностью зрелого сперматозоида с нормальной или близкой к нормальной морфологической структурой. Такой сперматозоид искусственно вводится непосредственно в цитоплазму ооцита.

p, blockquote 12,0,1,0,0 –>

Для этого осуществляются следующие манипуляции по этапам:

p, blockquote 13,0,0,0,0 –>

• предварительно микроиглой отделяется хвостик от тела отобранного наиболее активного сперматозоида, который, таким образом, обездвиживается; лишение мужской половой клетки ее активности не вредит ей, но необходимо для предотвращения повреждения ооцита движущимся сперматозоидом;
• последний, но уже без хвостика, путем аспирации втягивается в просвет стеклянной иглы-микропипетки;
• ооцит фиксируется с помощью микроприсоски с одной стороны в положении «9-и часов»;
• иглой-микропипеткой со сперматозоидом прокалывается оболочка ооцита с противоположной стороны (в положении «3-х часов) под контролем частичной ее аспирации;
• сперматозоид из микроиглы аккуратно вводится в цитоплазму яйцеклетки;

После такого оплодотворения ооциты отмываются и помещаются для дальнейшего культивирования (развития) в микрокапли специальной культуры (среды).

p, blockquote 14,0,0,0,0 –>

Оболочка ооцита очень эластична и самостоятельно быстро закрывается, а такой прокол для клетки малотравматичен и не оказывает влияния на дальнейшее развитие эмбриона. Возможность повреждения яйцеклетки во время манипуляций составляет менее 1%.

p, blockquote 15,0,0,0,0 –>

Оплодотворение методом ИКСИ осуществляется в случаях:

p, blockquote 16,0,0,0,0 –>

1. Когда имеются нарушения количественных и качественных показателей мужских половых клеток, в результате которых они неспособны проникнуть через оболочки яйцеклетки.
2. Невозможности проникновения даже полноценных сперматозоидов через утолщенную оболочку яйцеклетки, что часто встречается у женщин старших возрастных групп (после 40 лет).
3. Наличия антиспермальных антител при иммунологическом бесплодии (результаты MAP-теста составляют свыше 50%).
4. Неудачных попыток оплодотворения в лабораторных условиях в 2-х и более циклах ЭКО при нормальных показателях как женских, так и мужских половых клеток.

Наиболее часто процедура ИКСИ связана с причинами, относящимися к первому пункту, то есть к такой мужской патологии, как:

p, blockquote 17,0,0,0,0 –>

• олигозооспермия, выражающаяся в снижении концентрации мужских половых клеток и составляющая меньше 10 миллионов их в 1 мл эякулята; это является фактором, практически исключающим возможность естественного оплодотворения яйцеклетки;
• астенозооспермия при любых формах олигозооспермии — на фоне концентрации половых клеток в эякуляте, составляющей меньше 20 млн в 1 мл, количество именно активных подвижных сперматозоидов меньше 30%;
• азооспермия (полное отсутствие сперматозоидов в эякуляте) любой этиологии, но только в тех случаях, когда полноценные клетки можно получить в результате пункции яичек или их придатков.

p, blockquote 18,0,0,0,0 –>

Процедура ЭКО ИКСИ поэтапно

p, blockquote 19,0,0,0,0 –>

Методика ИКСИ является частью общей программы экстракорпорального оплодотворения, поэтому начальные ее этапы ничем не отличаются от классической ЭКО. За 1-2 месяца до планируемого периода проведения процедуры семейной паре назначаются необходимые предварительные обследования — общий осмотр, общие и клинические анализы крови и мочи, определение резус-фактора, анализы на наличие инфекций, передающихся половым путем, гормональный статус, ультразвуковое исследование, спермограмму и т. д.

p, blockquote 20,0,0,0,0 –>

Более подробную информацию о необходимых исследованиях Вы найдете в статье «Анализы при бесплодии».

p, blockquote 21,0,0,0,0 –>

Кроме того, даются рекомендации женщине и мужчине по образу жизни и способам предохранения во время менструального цикла, в котором предполагается проведение лечения. За 1-1,5 недели до начала менструации, предшествующей началу программы ЭКО методом ИКСИ, женщине проводится повторное эхографическое исследование, позволяющее оценить толщину и состояние слизистой оболочки матки, после чего начинается непосредственно подготовка к ЭКО, представляющая собой этапы по дням.

p, blockquote 22,0,0,0,0 –>

p, blockquote 23,0,0,0,0 –>

I этап

При необходимости, но, как правило, в соответствии с одной из разработанных схем, на 21-ый день предшествующего процедуре ИКСИ менструального цикла (при 28-дневном цикле) или на 23-й день (при 30-дневном цикле) назначается прием в течение 1,5 – 2-х недель или дольше одного из агонистов гонадотропин-рилизинг-гормона (ГнРг).

p, blockquote 24,0,0,0,0 –>

Это необходимо для угнетения самостоятельной активности яичников и повышения эффективности последующей их стимуляции. Возможны и другие схемы, но эта схема («длинная») наиболее часто используемая. О достаточности длительности приема препарата лечащий врач судит по данным мониторингового исследования уровня снижения содержания в крови эстрадиола и проведения УЗИ.

p, blockquote 25,1,0,0,0 –>

После достижения необходимой степени угнетения функции яичников дозировка агониста ГнРг снижается в 2 раза и начинается гиперстимуляция их функции в течение 12-14 дней, что дает возможность увеличить в яичниках число фолликулов. В этих целях используются производные гонадотропных гормонов гипофиза («Гонал-Ф», «Менопур» или «Пуригон») в индивидуально подобранных дозах.

p, blockquote 26,0,0,0,0 –>

От начала их введения ведется отсчет менструального цикла, в середине которого однократно назначается хорионичекий гонадотропин человека («Прегнил»), способствующий дозреванию фолликулов и подготовке их к пункции. Введение же производных гонадотропинов прекращается. Весь процесс лечения также осуществляется под контролем динамики УЗИ и результатов гормональных исследований.

p, blockquote 27,0,0,0,0 –>

p, blockquote 28,0,0,0,0 –>

II этап

p, blockquote 29,0,0,0,0 –>

Целью этого этапа являются:

p, blockquote 30,0,0,0,0 –>

• получение яйцеклеток;
• получение сперматозоидов.

Получение яйцеклеток

p, blockquote 31,0,0,0,0 –>

Яйцеклетки получают из зрелых фолликулов через 34-36 часов после введения хорионического гонадотропина. Процедура проводится под общим внутривенным наркозом и эхографическим контролем.

p, blockquote 32,0,0,0,0 –>

Она заключается в пункции специальной иглой заднего свода влагалища, затем далее — стенки яичника в области фолликула. При затруднении пункции через влагалище, что может быть связано с какими-либо анатомическими особенностями, пункция фолликулов осуществляется лапароскопическим методом.

p, blockquote 33,0,0,0,0 –>

После пункции фолликула производится аспирация фолликулярной жидкости вместе с ооцитом посредством вакуумного насоса. Длительность всей процедуры составляет от 15 до 40 минут. После забора ооцитов они отмываются в специальной среде и оцениваются специалистом-лаборантом на зрелость и качество.

p, blockquote 34,0,0,0,0 –>

В этот же день женщине назначаются прогестероновые препараты («Дюфастон», «Утрожестан»), что позволяет поддержать функционирование желтого тела, нормализовать соотношение половых гормонов и подготовить эндометрий к имплантации эмбриона.

p, blockquote 35,0,0,0,0 –>

После проведения процедуры возможны такие явления, как тошнота, рвота, вздутие живота, понос и т.д. Все они иногда могут быть связаны с приемом гормональных препаратов и развитием различных форм синдрома гиперстимуляции яичников. В то же время, причины вздутия живота после проведения процедуры чаще бывают вызваны нарушением моторики толстого кишечника, развитием пареза кишечника и скоплением газов. Это может происходить вследствие:

p, blockquote 36,0,0,0,0 –>

• влияния препаратов для наркоза, особенно, если процедура была длительной;
• раздражения брюшины во время пункции трансвагинальным методом, а еще чаще — лапароскопическим.

Посленаркозные нарушения кишечной перистальтики, а также связанные с трансвагинальной пункцией сохраняются недолго (не более 1-2 суток), а при лапароскопическом способе пункции они могут длиться до 3-5 дней.

p, blockquote 37,0,0,1,0 –>

Получение сперматозоидов осуществляется после 5 – 7-дневного полового воздержания в день забора яйцеклеток. Методика их получения может быть разной, в зависимости от имеющейся у мужчины патологии. Это может быть эякулят из презерватива (непосредственно после полового акта), а также полученный в результате мастурбации (обычно), механической вибрации, электростимуляции. При необходимости (обструктивная азооспермия) сперматозоиды могут быть получены с помощью пункции яичка или протока придатка яичка.

p, blockquote 38,0,0,0,0 –>

Затем сперма разжижается, сперматозоиды отмываются от семенной жидкости и подготавливаются одним из физических методов — фильтрацией, центрифугированием, флотацией или проточной цитометрией. Очень часто удается получить для проведения ИКСИ только единичные подвижные половые клетки, среди которых трудно осуществить надежный отбор. В этом случае применяются другие варианты методики очищения, концентрация спермы, инкубация половых клеток в питательной среде, стимуляция подвижности и т. д.

p, blockquote 39,0,0,0,0 –>

p, blockquote 40,0,0,0,0 –>

III этап

Он заключается в искусственном оплодотворении яйцеклетки сперматозоидом методом ИКСИ, описанным выше поэтапно.

p, blockquote 41,0,0,0,0 –>

p, blockquote 42,0,0,0,0 –>

IV этап

Этот период составляет от 2-х до 5-и дней, считая первым днем следующий после оплодотворения. На IV этапе осуществляется инкубация оплодотворенной яйцеклетки с последующим переносом эмбриона в полость матки.

p, blockquote 43,0,0,0,0 –>

В течение последующих 12-14 недель (до момента формирования плаценты) женщина должна принимать увеличенную вдвое дозировку препаратов прогестерона.

p, blockquote 44,0,0,0,0 –>

p, blockquote 45,0,0,0,0 –>

Прогноз

p, blockquote 46,0,0,0,0 –>

Метод ИКСИ позволяет обеспечить беременность в среднем в 50%, а нормальное развитие эмбриона — в 90-95%. Хотя он и не увеличивает вероятность наступления самой беременности, но значительно расширяет возможности для определенных семейных пар, поскольку гарантирует оплодотворение яйцеклетки.

p, blockquote 47,0,0,0,0 –>

ИКСИ не исключает возможности развития врожденной патологии у плода, в связи с отсутствием процесса естественного отбора половой клетки, который действует при естественном оплодотворении.

p, blockquote 48,0,0,0,0 –>

Однако в последнее время многими исследователями отвергается предположение о повышенном риске генетических нарушений у плода, связанных с ИКСИ, и высказывается мнение о возможности наследственной передачи заболеваний от родителей. Поэтому до проведения ЭКО этим методом мужчине и женщине все-таки рекомендуется прохождение медико-генетического консультирования.

p, blockquote 49,0,0,0,0 –> p, blockquote 50,0,0,0,1 –>

ИКСИ (от англ. ICSI — IntraCytoplasmic Sperm Injection , букв. введение сперматозоида в цитоплазму, интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида) — метод лечения бесплодия, один из вспомогательных методов искусственного оплодотворения (ЭКО). Большинство российских медиков в слове «ИКСИ» ставит ударение на последний слог, петербургские медики ставят ударение на первый слог. В разговорном языке «ИКСИ» обычно употребляют как существительное среднего рода. В медицинской литературе предпочитают устойчивое словосочетание «Метод ИКСИ».

В клинической практике метод ИКСИ впервые применен в 1992 году в Бельгии, в Центре репродуктивной медицины Брюссельского свободного университета [1] под руководством проф. Van Steirteghem. [2] [3]

Процедуру ИКСИ при ЭКО используют, когда присутствует хотя бы одно обстоятельство:

1. снижено количество сперматозоидов в сперме;
2. снижена подвижность сперматозоидов в сперме;
3. много патологических сперматозоидов в сперме;
4. в сперме содержатся антиспермальные антитела (АСАТ);
5. недиагносцируемые патологии сперматозоидов или яйцеклеток.

Процедуру ИКСИ проводят под микроскопом. Для манипуляции с яйцеклеткой и сперматозоидом используют стеклянные микроинструменты — микроиглу и микроприсоску (удерживающий капилляр). Микроинструменты присоединены к микроманипуляторам — устройствам, позволяющим переводить крупные движения рук (через джойстики) в микроскопические движения инструментов. Для ИКСИ врач-эмбриолог старается отобрать наиболее быстрый и морфологически наиболее нормальный сперматозоид. Его обездвиживают ударом микроиглы (перебивают хвост) и засасывают в микроиглу. Затем, удерживая яйцеклетку на микроприсоске, прокалывают оболочку яйцеклетки микроиглой и вводят внутрь неё сперматозоид.

Несмотря на кажущуюся противоестественность такого оплодотворения, эмбрионы, полученные с помощью процедуры ИКСИ, обладают нормальными способностями к развитию, а дети, рожденные после ЭКО с применением ИКСИ, не отличаются по своим физическим и умственным способностям от детей зачатых естественным путем.

Мечта семейной пары завести ребенка – естественное желание. Согласно данным Всемирной организации здравоохранения, около 5% населения планеты страдает бесплодием. На сегодняшний день современной медицине известно множество причин бесплодия (анатомические, генетические, эндокринные). Врачи-репродуктологи предлагают различные варианты решения проблемы бесплодия. В этой статье мы рассмотрим один из них, а также подробно расскажем, что такое ИКСИ и как его делают.

Что такое процедура ИКСИ

Аббревиатурой ИКСИ обозначается крайне эффективная технология терапии бесплодия, при которой более жизнеспособный сперматозоид вводится непосредственно в здоровую яйцеклетку под четким контролем соответствующего оптического прибора.

Методика была разработана и впервые применена в Бельгии в 1992 году. На сегодняшний день, что такое метод ИКСИ, знают во всем мире, соответственно, успешно применяют ее для борьбы с бесплодием.

Показания для проведения процедуры

Основными показаниями для проведения ИКСИ являются:

• патологические состояния эякулята (снижение количества сперматозоидов и/или их активности);
• отсутствие сперматозоидов в эякуляте;
• применение донорской спермы (криоконсервированной);
• женское бесплодие (независимо от причины, но за исключением состояний при которых невозможно вынашивание и роды);
• возраст женщины более 40 лет (дело в том, что оболочка яйцеклетки становится плотной, соответственно, сперматозоиды фактически не способны оплодотворить последнюю);
• неоднократные (более трех) неудачные попытки проведения ЭКО;
• получение менее пяти зрелых яйцеклеток после гормональной стимуляции овуляции;
• иммунологический конфликт между сперматозоидом и яйцеклеткой, положительный MAR-тест (организм женщины вырабатывает антитела, которые уничтожают сперматозоидов еще на пути к яйцеклетке).

Принцип методики

При осуществлении классического ЭКО для оплодотворения происходит забор нескольких яйцеклеток и большого количества эякулята. Они помещаются в питательную среду из расчета, что на одну яйцеклетку приходится 100-200 тысяч сперматозоидов. Самые здоровые сперматозоиды оплодотворяют яйцеклетку.

При ИКСИ процедура подготовки и непосредственное участие пары остаются такими же. Различия появляются уже на эмбриологическом этапе, при работе врача-репродуктолога.

Манипуляция осуществляется в специальной лаборатории под контролем микроскопа с увеличением в 400 раз. Перед процедурой из эякулята выделяют сперматозоиды, а яйцеклетки освобождают от всех защитных слоев. После этого оценивается состояние, а также зрелость клеток. Неготовые к оплодотворению яйцеклетки помещают в инкубатор до полной зрелости.

Важный момент ИКСИ – выявить наиболее активного сперматозоида и корректно оценить состояние яйцеклетки. Именно от этого этапа зависит успех процедуры, здоровье будущего ребенка.

Репродуктолог помещает зрелую яйцеклетку и самого активного сперматозоида на предметное стекло под микроскоп. Яйцеклетка фиксируется микроприсоской. У сперматозоида отсекается хвостик. Головка, несущая в себе генетический материал, захватывается микроиглой и вводится в цитоплазму яйцеклетки.

Для максимального контроля и точности движений микроинструменты подключены к джойстикам-манипулятором, через которые врач проводит всю процедуру. Они переводят крупные движения репродуктолога в микроскопические, точные действия микроинструментария. Подобная процедура проводится со всеми полученными зрелыми и здоровыми клетками.

После интраплазматического введения сперматозоидов приступают к культивированию эмбрионов на питательных средах в специальных условиях. Они полностью имитируют организм женщины: температура составляет 37 о С, а концентрация углекислого газа 5%.

Этапы проведения процедуры и ее особенности

Экстракорпоральное оплодотворение и ИКСИ очень схожи между собой на этапах подготовки. Партнерам, прежде всего, придется сдать ряд анализов:

• узнать группу крови, а также резус-фактор;
• урогенитальные патологии (здесь имеются в виду инфекционные);
• на герпес-вирус;
• тест на ВИЧ;
• на RW (сифилис);
• исследование крови на гепатиты В и С;
• анализ на иммуносовместимость – MAR-тест;
• гормональный профиль.

Обязательные обследования для женщины и мужчины представлены в таблице ниже:

После полного обследования проводится стимуляция яичников гормональными средствами. Это необходимо для быстрого созревания сразу нескольких яйцеклеток. Такой подход значительно увеличивает шансы успешного оплодотворения. Также женщинам рекомендуется избегать стрессов. Полезными считаются умеренные физические нагрузки, регулярные прогулки, положительные эмоции.

Мужчинам запрещено в течение этого времени употреблять алкоголь, наркотические вещества. Необходимо полностью исключить табак, ограничить количество жирной, жаренной, острой пищи. Стрессовые ситуации, хроническая усталость могут негативно сказаться на качестве эякулята. В среднем эти этапы занимают от 1 до 1,5 месяцев.

Дальнейшие этапы ИКСИ это:

1. Забор яйцеклеток. Осуществляется с помощью пункции яичника под контролем УЗИ. Для женщины процедура происходит безболезненно.
2. Забор спермы. За 5-7 дней до забора материала необходимо полностью отказаться от курения, алкоголя, наркотических веществ, приема медикаментов, сексуальных контактов и мастурбации. Иногда требуется пункция яичек.
3. Подготовка сперматозоидов и яйцеклетки для искусственного оплодотворения.
4. Перенос генетического материала мужчины в яйцеклетку.
5. Инкубационный период (занимает от 3 до 5 дней).
6. Контроль качества эмбриона.
7. Размещение эмбриона в матке (с помощью специального катетера под контролем УЗИ-аппарата).
8. Поддерживающий курс гормональной терапии, постоянное наблюдение у врача-репродуктолога, гинеколога.

Целесообразность и вероятность проведения ИКСИ оценивается еще на первоначальных фазах. Это возможно после проведения MAR-теста (на иммунологическую совместимость партнеров) и спермограммы.

В чем разница между ЭКО и ИКСИ

ЭКО – это основная манипуляция, направленная на оплодотворение яйцеклетки непосредственно в лаборатории с дальнейшим помещением эмбриона в матку. ИКСИ – это дополнительный протокол ЭКО.

ИКСИ – это не альтернатива ЭКО. Интраплазматическая инъекция сперматозоида – это эффективный метод помощи парам, которым классическое экстракорпоральное оплодотворение не дает положительного результата. Стоит отметить, что ИКСИ – более трудоемкий и дорогостоящий метод, поэтому репродуктологи стараются прибегнуть сначала к классическим техникам.

Противопоказания

Противопоказаниями для проведения данной процедуры такие же, как для обычной беременности и классического ЭКО:

• хронические заболевания внутренних органов в тяжелой форме (сахарный диабет, легочная, сердечная или почечная недостаточность);
• психические расстройства;
• инфекционные заболевания;
• урогенитальные инфекции;
• ВИЧ;
• онкологические заболевания, независимо от их локализации;
• анатомические аномалии организма женщины, препятствующие вынашиванию и рождению ребенка;
• тяжелая анемия;
• ряд аутоиммунных заболеваний;
• в анамнезе у мужчины вазэктомия, химиотерапия.

Во всех случаях оценка возможности проведения ИКСИ проводится индивидуально рядом специалистов: репродуктологом, акушер-гинекологом, терапевтом, инфекционистом, психиатром, врачом-генетиком. Только такой подход позволит провести успешную процедуру и родить здорового ребенка.

Риски

Основные риски связаны с тяжестью протекания беременности:

• внематочная беременность;
• многоплодная беременность;
• самопроизвольный аборт;
• мертворождение.

Даже самый опытный специалист не может дать гарантий, что после проведения искусственного оплодотворения женщина сможет без проблем выносить абсолютно здорового ребенка.

При проведении ИКСИ уровень рисков такой же, как при классическом ЭКО. Сама процедура никак не снижает шансы рождения здорового ребенка и не оказывает более негативного воздействия на организм матери.

Согласно оценкам экспертов, успех процедуры составляет около 50%, а вероятность корректного развития эмбриона, рождения здорового ребенка доходит до 90%. Подобная статистика дает шанс бездетным парам стать счастливыми родителями. Конечно, шанс во многом зависят от особенностей пары. Партнеры в возрастной группе 25-35 лет, с адекватным гормональным фоном, без генетических патологий имеют более высокие шансы на зачатие.

Выбор методики искусственного оплодотворения – дело врача-репродуктолога. Только опытный, квалифицированный специалист сможет помочь семье обрести счастье в виде здорового ребенка.