Взятие мазка на бакпосев

Цель:определение патогенной флоры во влагалище, в полости матки, в

Методика забора материала из влагалища:

1.Объясните пациентке цель данного исследования и что будет сделано.

2.Приготовьте:

· Стерильную сухую пробирку со стерильной палочкой или питательную среду в пробирке;

3. Обработайте кресло 0,5% раствором гипохлорита кальция, постелите индивидуальную пеленку.

4. Уложите женщину на гинекологическое кресло.

5. Обработайте наружные половые органы антисептиком.

6. На обе руки наденьте стерильные перчатки (покажите женщине).

7. Осторожно введите гинекологическое зеркало, обнажите шейку матки и влагалищные своды (обеспечьте достаточное освещение).

8. Забор на бак.посев можно проводить двумя способами:

а) берут стерильную палочку и стерильную пробирку в правую руку, левой палочку погружают в отделяемое заднего свода влагалища. После этого палочку сразу опускают в стерильную пробирку.

б) менструальная кровь, аспирационный материал из полости матки, содержимое пункции заднего свода или кистозного образования, операционный материал (жидкость, гной, кусочки ткани) также вливают в стерильную пробирку.

9. Осторожно выводим зеркало.

10. Зеркало погружаем в 0,5% раствором гипохлорита кальция на 30минут.

11. Одноразовые перчатки выбросьте согласно указаниям.

12. Подпишите направление на бак.посев, на флору и чувствительность к антибиотикам:

· Название учреждения, где произведен забор.

· Название учреждения, где будет проводиться исследование.

Правильный диагноз невозможно поставить без предварительно сделанных анализов. Полученная информация помогает врачу в диагностике и обеспечивает назначение правильного лечения. Одним особенным анализом считается бактериальный посев. Он берется из разного биологического материала. В статье рассмотрим все стороны и особенности этой процедуры.

Определение бактериального посева

Под бактериологическим посевом понимают особенное микробиологическое исследование, которое проводится в условиях лаборатории. В качестве исследуемого образца берется биологический материал, который подвергается просеиванию при определенной температуре. Цель такого исследования: выявить наличие микроорганизмов и установить их количество. В дальнейшем врач назначает по полученным данным лечение.

Бактериологический анализ широко применяется в онкологии, гинекологии, отоларингологии, хирургии, урологии и других областях.

Показанием для проведения бактериологического исследования считается воспалительный процесс в органах, системах человека и подозрение на заболевание сепсис.

Для исследования могут брать следующий бактериологический материал:

• Мокроту.
• Слизь из зева.
• Слизь из уретры.
• Мочу.
• Сперму.
• Грудное молоко.
• Содержимое кисты.
• Спинномозговую жидкость.
• Желчь.
• Кровь.
• Материал, отделяемый от раны.
• Содержимое воспалительных очагов.
• Кал.
• Слизь из носоглотки.

Из каждого перечисленного биологического материала высеивают следующие микроорганизмы:

1. Слизь из урогенитального тракта исследуют на гонококк, трихомонаду, грибы Candida, уреаплазму, грибы Neisseria gonorrhoeae , микоплазму, грибы Trichomonas vaginalis, листерии. Так же здесь проверят состояние бактериальной флоры.
2. Кровь обследуют на стерильность.
3. Слизь зева и носа проверяют на листерии, гемофильную палочку, гемолитические стрептококки, менингококк, коринобактерии дифтерии, пневмококки, золотистый стафилококк.
4. Раневое отделяемое, гнойные отделения, биопунктат исследуют на синегнойную палочку и псевдомонады.
5. Кал проверяют на йерсинии, сальмонеллы, тифопаратифозный бактерии, условно-патогенные кишечные инфекции, пищевые токсикоинфекции. Так же испражнения обследуют на дисбактериоз кишечника.
6. Мазок, грудное молоко, мочу, соскоб, желчь, сперму, суставную жидкость проверяют на бактериальную флору.

Достоинства и недостатки бактериального посева

К положительным моментам бактериального посева относят:

• Метод исключает ложные реакции.
• Позволяет проводить проверку абсолютно любой жидкости.
• Результат исследования позволяет врачу правильно назначить лечение.

К отрицательной стороне относят:

• Достаточно длительный промежуток проведения исследования.
• Очень высокие требования к получению исследуемого материала.
• Жесткие требования к квалификации персонала, которые проводят бактериологическое исследование.

Как собирают биологический материал

Качество исследования сильно зависит от правильности собранного биоматериала. Поэтому существуют строгие правила по забору, без соблюдения которых невозможно получить правильную информацию о состоянии здоровья человека.

1. Собирать материал необходимо стерильными инструментами и помещать собранное только в стерильную посуду. Если это проигнорировать, забор материала и дальнейшие исследования станут бессмысленными.
2. Собирать биоматериал необходимо строго до начала проведения терапии антибиотиками. В противном случае лаборант выявит ложные данные. Если пациент на сегодняшний день уже проводит антибактериальную терапию, то бактериологические исследования нужно проводить только через 10 дней после окончания приема последней таблетки.
3. При сборе мочи нужно брать только среднюю порцию в утреннее время. Моча обязательно помещается в стерильную посуду. Количество собранного материала должно ровняться 10-15 мл. Кроме этого, обязательно нужно постараться доставить мочу в лабораторию менее чем через 2 часа после сбора.
4. Перед сбором слизи из носа или зева нельзя есть, пить, чистить зубы и полоскать ротовую полость дезинфицирующими средствами.
5. Сбор кала должен осуществляться стерильной лопаточкой. Время сбора утреннее. Складывать материал необходимо в стерильную посуду. Количество собранного кала должно равняться 15-30 грамм. Доставить его в больницу нужно менее чем за 5 часов. Нельзя оставлять кал на ночь и проводить замораживать его.
6. Грудное молоко сцеживается только после проведения гигиенической процедуры. Для этого область сосков и груди тщательно промывают водой, затем обрабатывают тампоном этилового спирта крепостью 70%. Далее сцеживают 15 мл молока, которое не идет на исследование. Следующие 5 мл сцеживают в стерильный контейнер, его и направляют в лабораторию. Доставить материал необходимо в течение двух часов.
7. Кровь на бактериологическое исследование забирают на фоне температуры. Для детей ее количество равняется 5 мл, для взрослых — 15 мл. Здесь нельзя забывать, что забор не проводится в период приема антибиотиков.
8. Собирать мокроту необходимо во время начавшегося приступа кашля. В этот момент из горла выделяется слизь. Мокрота доставляется в лабораторию в течение одного часа.
9. У женщин материал собирают спустя 14 дней после менструации, женщинам нельзя мочиться в течение 2 часов, а так же после приема антибиотиков должен пройти минимум один месяц. При сборе спермы у мужчин нельзя мочиться примерно 5-6 часов до взятия анализа.

Особенности проведения бактериологического анализа

Исследованию подвергаются любые материалы. У каждого из них есть свои особенности проведения.

Посев крови

В нормальном состоянии кровь не содержит никаких возбудителей. Определить их наличие под прибором микроскоп просто невозможно. Для выявления микроорганизмов бактерии сначала размножают в жидкой среде, которая является для них питательной. Затем образцы крови находятся в созданных для них условиях (при температуре 37˚С) до начала видимого роста. Длится этот процесс от 6 до 18 часов. Если исследуются бактерии, которые растут очень долго, кровь выдерживается в питательной среде в течение нескольких дней. Когда бактерии достигают определенных размеров их можно увидеть под микроскопом. На следующем этапе с выявленными бактериями проводят химические реакции, для того чтобы точно определить их вид.

Посев мочи

При исследовании лаборант выявляет микроорганизмы и определяет их количество. Диагностическое значение равняется 104-105 КОЕ/мл. Если их концентрация превышает норму, то говорят о положительном результате, то есть бак посев плохой. Лечение в этом случае сводится к приему антибиотиков, которые наиболее чувствительны к высеянным микроорганизмам. При анализе бывают случаи, когда общий анализ хороший, человек не имеет жалоб, а бак посев показывает кишечную палочку. В этом случае, скорее всего, не были соблюдены стерильные условия. Поэтому сбор и проведение повторных исследований придется повторить.

Посев мокроты

Подобный анализ назначается при частых и затяжных бронхитах. Вместе с выявлением патогенных микроорганизмов лаборант определяет чувствительность к антибиотикам. Это позволяет в дальнейшем правильно назначить эффективное лечение, сократить время болезни и добиться необходимого выздоровления.

Посев кала

Кал проверяют при различных кишечных инфекциях. В материале лаборант идентифицирует возбудителя. В здоровом кишечнике имеются некоторые условно-патогенные микроорганизмы в нужном качестве и количестве. Если микрофлора кишечника изменяется, то названные показатели тоже меняются. Больной жалуется на урчание, проблемы со стулом, метеоризм и боли в животе. Если возникает рвота и сильное расстройство стула, то бак посев проводят на дисбактериоз.

Бактериальный посев кала имеет следующую расшифровку:

• Первая степень: имеются небольшие изменения микробиоценоза, чужая микрофлора не наблюдается.
• Вторая степень: изменено количество бифидофлоры и лактофлоры, так же проверяют число эшерихий.
• Третья степень: на этой стадии резко снижены или вообще отсутствуют лактофлоры, бифидофлоры, но преобладают дрожжеподобные грибы и гемолитические стафилококки.
• Четвертая степень: здесь микробиоценоз сильно изменен, количество патогенных микроорганизмов сильно увеличено, выявляется протей.

На результат сильно влияют (в неправильную сторону) прием прибиотиков и антимикробных средств.

Посев спермы

Эякулят проверяют при болезнях урогенитальной области, а так же при подозрении на мужское бесплодие. Бак посев выявляет патогенные микроорганизмы, на которые в дальнейшем направляется основное лечение.

Есть несколько правил сдачи бак посева:

1. Полное исключение половых контактов в течение 7 дней.
2. Категорический запрет на прием алкогольной продукции за 4 дня до анализа.
3. Если мужчиной принимались антибиотики, то посев назначают через 2 недели после окончание приема.
4. Собирать сперму необходимо в контейнер со специальной питательной средой.
5. Перед процедурой необходимо пописать, хорошо на совесть помыть руки с антибактериальным средством, сделать туалет с мылом мочеиспускательного канала. Далее половой член и головку вытереть стерильной салфеткой. Сперму собрать с помощью специальных манипуляций под названием мастурбация. Касаться в этот момент контейнера нельзя. Собирать эякулят нужно в утреннее время.
6. Строго соблюдать время доставки спермы: в течение трех часов после процедуры сбора. Если по определенным причинам материал нельзя доставить в больницу вовремя, то его на время допускается поместить в холодильник. Время нахождения эякулята там не должно превышать 24 часов.
7. В случае если сперму проверяют на микоплазму и уреаплазму, флакончик с материалом помещают в специальную транспортную среду.
8. Анализ спермы обычно готов через неделю после сдачи.

Посев на флору

Так называют забор материала из влагалища. Проводят его сериальными инструментами в условиях больницы. Дискомфорт и неприятные ощущения женщине взятие материала из влагалища не доставит. Однако некоторую боль принесет сбор материала из уретры. Но для своего здоровья эту процедуру придется потерпеть. К тому же нужно быть готовой, что неприятные ощущения повторяться при первом мочеиспускании после мероприятия. Но они довольно быстро отпустят.

Когда бак посев на флору проинформирует о заболевании, доктор назначит соответствующее лечение. После приема препаратов всегда проводится повторный бак посев. По его результатам врач сможет скорректировать назначенную терапию.

Бактериальный посев при беременности

Чаще всего бак посев используется в гинекологии. Особенно при беременности. За все время вынашивания плода женщина множество раз сдает необходимые анализы. В этом списке присутствует и бак посев. Беременным женщинам он показан в обязательном порядке. Анализ также можно сделать еще на этапе планирования будущего ребенка.

При беременности исследуются биологический материал зева, носа и мочи. Анализ позволяет выявить опасные микроорганизмы, которые пагубно повлияют на развитие ребенка.

Не стоит бояться самой процедуры. Материал для исследования забирается гинекологом очень аккуратно.

Известно, что нарушения в формировании плода могут вызвать трихомонады, стафилококк, микоплазмы, хламидии и уреаплазмы. Наличие подобных микроорганизмов может привести даже к смерти плода. Такой грибок, как Кандида, провоцирует воспаление тканей, которые в последствие в родах подвергаются сильным разрывам.

Бакпосев позволяет выявить болезни, которые протекают в латентной форме. Они так же являются опасными как для плода, так и для здоровья самой матери. В случае их выявления проводится необходимое лечение. По его окончанию врач назначает повторное бактериологическое исследование.

В женских консультациях проверяют посев из носа и зева. Анализ необходим для выявления золотистого стафилококка, который является основной причиной возникновения послеродового сепсиса и гнойного мастита. При обнаружении лечение проводят еще до родов.

Исследование мочи беременных в лаборатории позволяет вовремя обнаружить патологию. В этот период нарушается пассаж мочи по естественным путям и в организме создаются все условия для развития вредной микрофлоры. Остановка этого процесса позволяет предупредить пиелонефрит, который часто мучает беременных женщин. Существуют определенные сроки сдачи бак посева мочи. Это время постановки на учет и тридцать шестая неделя беременности. Сдавать анализы придется в несколько раз больше, если у женщины есть к этому показания. Например, болезнь почек, лейкоциты и белок в моче.

Техника проведения бактериологического посева

Всего техник существует несколько. Большинство из них осуществляются с применением следующих инструментов:

• Микробиологическая петля.
• Чашка Петри.
• Специальная петля с пипетками,.
• Шпатели.
• Иглы.

Микробиологическая бактериальная петля является универсальной, так как применяется во всех техниках. Для жидких материалов используют петлю с пипетками.

Последние два инструмента применяют при посеве на чашку Петри. Ее считается особенной. Ее применяют специально для посева на плотную среду. Чашка представляет собой специальный лабораторный сосуд плоской формы небольшой высоты. Изготавливают ее из прозрачного полистирола или стекла. В диаметре чашка Петри может равняться 50-100 мл. Высота ее всегда примерно 15 мл. Чашка Петри может быть двух видов: стеклянной и пластмассовой. Первая предназначения для многоразового использования, а вторую можно применять только один раз. Пластмассовая чашка является более стерильной, так ее доставляют в лабораторию в специальной плотно закрытой упаковке. Стеклянную чашку перед проведением бактериологического исследования всегда тщательно стерилизуют.

Бакпосев проверяют в специальных средах, которые могут быть твердыми или жидкими. Если размножается жидкий материал, то лаборанты используют пробирки.

Техника бактериологического исследования состоит в следующем: чашку Петри приоткрывают, затем наносят на плотную среду биологический материал. Далее начинают наблюдать за ростом этого материала. Бактерии начинают равномерно увеличиваться в количестве, превращаясь в густую полноценную культуру. После чего они начинают делиться на колонии. Спустя некоторое число дней лаборант идентифицирует возбудителя. Параллельно с эти проводя проверку на чувствительность к антибиотикам.

Результат посева

В конце проведенного исследования лаборант должен получить от исследуемого образца две оценки:

• Качественную (есть ли подозреваемый возбудитель в исследуемом биологическом материале).
• Количественную (какая его концентрация обнаружилась).

Качественную оценку расшифровывают с помощью степеней роста. Их выделяют всего четыре.

• Первая степень: небольшой рост на довольно жидкой среде, в твердой среде рост полностью отсутствует.
• Вторая степень: рост возникает на плотной среде (около 10 колоний).
• Третья степень: так же оценивается рост на плотной среде (10-100 колоний).
• Четвертая степень: больше чем 100 колоний.

В случае рассмотрения условно-патогенной флоры первые две степени не считаются болезнями. Скорее всего, это обычная загрязненность биологического материала. Третья и четвертая степень позволяет уже выявить причину заболевания.

Если анализ показал патогенную флору, то в расчет берутся все четыре перечисленных степени.

Количественная оценка принимается условно и определяется в КОЕ. Характеристика означает сообщество бактериальных клеток, которые смогли вырастить в колонию.

Колонии и КОЕ/мл соотносятся следующим образом:

• 103/мл считается 1 колонией;
• 104/мл берется 1- 5 колоний;
• 105/мл это достаточный рост в 5-15 колоний;
• 106/мл считается, что колоний более 15.

Количественная оценка так же важна. Она помогает определить степень обсемененности и провести контроль сделанного лечения.

Существуют примерные сроки готовности результатов посева:

• Флора: 4-7 дней.
• Слизь из носоглотки: 5-7 дней.
• Кал: 4-7 дней.
• Урогенитальный материал: 4-7 дней.
• Кровь на определение стерильности: 10 дней. Однако здесь можно сказать предварительный результат уже через три дня.

Бактериальный посев — это весьма важная процедура, которая дает хорошую информативность о возбудителе болезни человека. Если ее назначил врач, то анализ необходимо обязательно пройти.

Способ отбора клинического материала для микробиологического исследования (бакпосева), сроки и условия его транспортировки очень существенно влияют на точность и достоверность результатов.

Общие правила отбора клинического материала для микробиологического исследования (бак посева).

За 7 сут. до взятия материала прекращают лечение антибиотиками (или антимикотиками – при микологическом анализе). Если проводится местное лечение, также прекращают медикаментозную обработку очага поражения.

В направлении необходимо указать вид и место взятия материала и отметить, какое микробиологическое исследование следует провести:

1. Бактериологический посев

2. Бактериологический посев + микроскопия мазка на микрофлору

3. Микологический посев (в т.ч. на скрытое миконосительство).

4. Бактериологический + микологический посевы (комплексное исследование, позволяющее получить наиболее информативные результаты).

Отбор клинического материала для бактериологического исследования.

Коллекторы (тупферы) (ватные тампоны-зонды + транспортная среда)

Контейнеры с крышками для клинического материала («банки для мочи»)

Предметные стекла (для мазков) (обезжиренные)

Флаконы с питательной средой Hemoline (для посева крови).

1. Кровь (посев на стерильность). Посев крови проводят непосредственно на месте сразу после взятия крови. Кровь для посева отбирают шприцем или системой для взятия крови (Vacuette), строго соблюдая правила асептики, в объеме 3-5 мл. После взятия кровь сразу же засевают через иглу во флаконы со специальной средой Hemoline через резиновую пробку флакона. Засеянный флакон направляют в лабораторию.

2. Моча. Собирают в стерильные контейнеры, среднюю порцию свободно выпущенной мочи, в количестве 3-5 мл, после тщательного туалета наружных половых органов. Также мочу можно отбирать методом цистоцентеза, через катетер (см. также Бакпосев мочи).

3. Мокроту, слюну, сперму, грудное молоко собирают также в стерильные контейнеры, не менее 1-2 мл, по возможности избегая контаминации материала извне.

4. Пунктаты, содержимое абсцессов, асцитную, синовиальную жидкость отбирают с соблюдением правил асептики шприцем, не менее 1-2 мл, и в шприце направляют в лабораторию.

5. Отделяемое слизистых, кожи, ран, глаз, ушей и т.д. собирают ватным тампоном-зондом, который сразу помещают в пробирку с транспортной средой. Если место отбора сухое (например кожа), тампон предварительно смачивают стерильной жидкостью (физ. раствор или вода для инъекций). При отборе материала из половых органов предварительно проводят их туалет.

6. Взятие мазка для микроскопии на микрофлору. Берут материал отдельным тампоном-зондом, наносят, растирая, на обезжиренное предметное стекло. С другой (чистой) стороны стекла стеклографом очерчивают область мазка. Номер мазка ставят на той же стороне стекла, где нанесен мазок. Мазок высушивают на воздухе ок. 10 мин, помещают в индивидуальный пакетик.

7. Взятие материала для микологического исследования (посев на грибы и актиномицеты). Метод взятия зависит от локализации поражения:

А) Если поражение находится на гладкой коже, в слуховом канале, межпальцевых пространствах, кожных складках и т.п., материал отбирают ватным тампоном-зондом (как и для бактериологического исследования), помещают в транспортную среду. Для комплексного исследования (микология+бактериология) в этом случае достаточно одного тампона.

Б) Если поражен шерстный покров, пинцетом отбирают волосы с периферии пораженного участка, извлекая их с корнем. Также пинцетом собирают корочки, чешуйки в достаточном количестве (малое количество материала снижает достоверность анализа!). Если поражение выражено слабо (незначительное шелушение), можно сделать неглубокий соскоб кожных чешуек. Пораженные участки когтей откусывают кусачками, можно дополнительно сделать соскоб с когтя. Материал помещают в контейнеры с крышкой («банки для мочи») или стерильные чашки Петри или делают конверты из чистой бумаги. Крайне нежелательно помещать материал в пробирки. Эппендорфа, в шприцы, между предметными стеклами и т.п. Если помимо микологического следует провести и бактериологический анализ, то дополнительно из очага отбирают материал ватным тампоном-зондом, помещают его в транспортную среду.

В) Для исследования на скрытое миконосительство грибов-дерматофитов делают счёсы шерстного покрова обеззараженной щёткой (лучше зубной), стараясь охватить всю поверхность тела. Как вариант, стерильной марлевой салфеткой (стандартной, 5х5 см) протирают кожный покров животного, салфетку направляют в лабораторию (в данном случае собирать шерсть не нужно, споры грибов остаются на марле).

Хранение материала. Собранный материал должен быть доставлен в лабораторию в течение 1 сут. (24 ч). Материал в транспортной среде и материал для микологического исследования при необходимости может храниться до 3-5 дней (однако выдача ответа задержится на это же время). Весь материал до отправки в лабораторию хранят при комнатной температуре (не в холодильнике!)